[01062254]中华鳖抗白点病亚单位疫苗的开发与应用

2012年01月～2014年12月，从余杭顺升农业开发有限公司的病鳖肝脏中分离获得嗜水气单胞菌AH TL1。以嗜水气单胞菌单胞菌基因组DNA为模板进行PCR扩增，获得嗜水气单胞菌的DnaK基因和DnaJ基因。将上述两个基因的PCR产物纯化后分别与载体连接，转化至大肠杆菌中，筛选阳性克隆，获得重组质粒。将重组质粒转化至大肠杆菌中，筛选阳性克隆，获得转化子，培养、纯化重组蛋白AH rDnaK和AH rDnaJ。重组蛋白AH rDnaK和AH rDnaJ制备成重组蛋白含量为100μg/ml的亚单位疫苗。给中华鳖幼鳖注射AH rDnaK和AH rDnaJ亚单位疫苗进行免疫试验。所开发的蛋白亚单位疫苗已在余杭顺升农业开发有限公司初步测试，获得良好效果，若能在相关养殖企业推广，预计可明显增加经济效益；实验室条件下注射制备的AH rDnaK和AH rDnaJ亚单位疫苗，测试中华鳖幼鳖死亡率比对照组分别约低30%和12%。项目实施过程中，已开发中华鳖嗜水气单胞菌病的亚单位疫苗2种；申请发明专利1项；发表论文2篇。