[01110939]改变巨噬细胞极性:apoA1/ABCA1抗动脉粥样硬化的新机制

动脉粥样硬化性心血管病发病率和死亡率逐年上升,严重危害人类健康,迫切需要有效的防治办法。目前公认动脉粥样硬化是炎症性疾病,HDL有抗动脉粥样硬化的作用,巨噬细胞在动脉粥样硬化炎症过程中起重要作用,我们推测HDL可能通过抑制巨噬细胞炎症发挥抗炎作用和抗动脉粥样硬化作用。因不同极性的巨噬细胞在炎症过程中可能发挥促炎（M1型）或抗炎（M2型）等完全相反的作用,我们在国家自然科学基金支持下,以体外培养的C57BL/6J 小鼠骨髓巨噬细胞作为细胞模型,观察了HDL的主要组分apoA1 对干扰素（IFN-γ）+脂多糖（LPS）诱导的M1型巨噬细胞表面分子CD16/32、CD206及细胞因子IL-10、IL-12 表达的影响。同时观察apoA1 处理后LTR4, MyD88,IRF5 表达的变化。 1、第一部分细胞实验选取C57BL／6小鼠,体外培养小鼠骨髓源性巨噬细胞,分别用5、10、15 mg /L 浓度的载脂蛋白A1 孵育细胞24 h 后,应用流式细胞术检测膜分子CD16 /32、CD206 的表达; 用ELISA检测白细胞介素10（IL-10）和白细胞介素12（IL-12）的分泌; 应用实时荧光定量PCR检测Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）、干扰素调节因子5（IRF5）mRNA的表达。 结果发现经载脂蛋白A1 干预后的巨噬细胞,CD16 /32、IL-12 表达明显下降,CD206、IL- 10 表达明显升高,并伴有TLR4、MyD88、IRF 5 mRNA 表达的下降,呈剂量依赖性。 结论：apoA I促进巨噬细胞向抗炎性M2 型巨噬细胞极化,并伴有TLR4、MyD88、IRF 5 mRNA 表达的下降。 2、第二部分细胞实验分为3组： （1）对照组：常规培养小鼠骨髓源性巨噬细胞48 h,不给予任何药物处理; （2）模型组：细胞培养24 h后加干扰素（100 U／ml）和脂多糖（5 ng／ml）后继续培养24 h; （3）处理组：先予10μg／ml浓度的人apoAI孵育细胞24 h,换液后加入干扰素（100 U／m1）和脂多糖（5 ng/ml）孵育24 h。 应用流式细胞仪检测膜分子CDl6／32、CD206的表达;应用ELISA检测白细胞介素IL-10和IL-12的分泌;应用实时荧光定量PCR检测TLR4、MyD88、IRF5 mRNA的表达。 结果发现处理组巨噬细胞CDl6／32表达阳性率（91．17％±1．99％比50．47％±1．02％,P＜0．05）、IL-12分泌[（747．27±3．74）pg/ml比（73．80±4．56）pg/ml,P＜0．05]明显低于模型组;CD206阳性率（0．33％±0．12％比3．00％±0．36％,P＜0．05）、IL-10分泌[（23．56±4．30）pg/ml比（32．91±2．47）pg/ml,P＜0．05] 明显高于模型组。TLR4 mRNA（1．000±0．025比0．708±0．003,P＜0．05）、MyD88mRNA（1．591±0．005比1．341±0．005,P＜0．05）和IRF5 mRNA（0．954±0．005比0．463±0．003,P＜0．05）表达均显著低于模型组。 结论：apoA I促进炎症型巨噬细胞向抗炎型巨噬细胞转变,此效应可能与抑制TLR4-MyD88-IRF5通路有关。 总结论：apoA I不仅促进非极化的巨噬细胞向抗炎性M2型巨噬细胞极化,还能促进已极化为炎症型的巨噬细胞向抗炎型巨噬细胞转变,这些作用可能与apoA I抑制TLR4-MyD88-IRF5通路有关。本研究揭示了HDL抗动脉粥样硬化的新机制。