[01140729]壮药三七姜、阴香、荷莲豆、榕树叶的质量控制与优化

1.任务来源 任务来源于2012年广西科学研究与技术开发计划项目,项目名称为：三七姜、阴香、荷莲豆、榕树叶的质量控制与优化,合同编号为：桂科重12118005-2-3,制定了三七姜、阴香、荷莲豆、榕树叶的质量标准,重点对三七姜挥发油的活性成分进行抗肿瘤作用及其机制的研究。 2、应用领域、技术原理及性能指标 （1）本项目运用中医学、中药学、化学、药理学、分子生物学、现代色谱分离分析技术等多学科的研究方法和技术相结合,针对壮药质量评价的关键环节,系统研究壮药的质量控制方法,为完善三七姜、阴香、荷莲豆、榕树叶的质量标准和开发壮药制剂提供科学依据。采用MTT法、流式细胞术、PCR 、Western blot等体外试验来观察三七姜挥发油的抗肿瘤作用,探讨三七姜挥发油对CNE-2肿瘤细胞的生长抑制作用,探讨其作用机制,为开发新的抗鼻咽癌药物提供科学依据。 （2）完成的性能指标 1)制定三七姜、阴香、荷莲豆、榕树叶4个药材的标准,已经申请备案。 2)授权国家发明专利3项,已发表学术论文5篇,其中3篇为国家核心期刊收录,培养3名硕士。 3)本研究首次提出三七姜挥发油对不同的肿瘤细胞株的抑制作用及抗鼻咽癌的作用机制,说明它的抗肿瘤作用,为今后申报国家自然科学基金和研制三七姜挥发油制剂奠定良好的基础。现在继续研究三七姜挥发油的抗肿瘤作用机制,正在进行三七姜挥发油对CNE-2细胞侵袭和转移作用的研究。 3、技术的创造性与先进性 （1）建立了三七姜、阴香、荷莲豆和榕树叶的质量标准,为4种药材的质量控制提供法定依据。 （2）探索了三七姜挥发油的抗肿瘤活性,首次提出三七姜挥发油对不同的肿瘤细胞株的抑制作用及初步探讨其抗鼻咽癌的作用机制。首次检测和分析三七姜挥发油对CNE-2细胞周期阻滞及其相关调控基因表达的影响,旨在为三七姜挥发油诱导CNE-2细胞周期G1期阻滞提供候选分子机制。 （3）研究成果为今后系统研究三七姜抗鼻咽癌的作用机制奠定良好基础,为开发三七姜制剂提供科学依据。 4、技术的成熟程度、适用范围和安全性 姜三七挥发油是一种比较典型的挥发油,其含有萜类及半倍萜类等多种成分,与姜科属植物的挥发油具有某些相似成分,应具有抗肿瘤作用。本课题对三七姜挥发油的制剂学研究及三七姜的产业化技术开发具有重要意义。 5. 应用情况及存在问题 （1）明确姜三七挥发油中何种成分起作用,其具体的诱导肿瘤细胞的凋亡机制等问题都有待进一步深入研究。 （2）由于药物抗肿瘤的机制较为复杂,基因表达存在多层次、多靶点的复杂调控机制,其中转录水平的调控、转录后调控、翻译及翻译后调控等因素都对最后蛋白的表达及其功能有影响。因此,后续实验将对筛选出有表达差异的周期相关基因进行蛋白水平及体内试验验证,其机制还需深入探讨。 （3）今后可开展研制以姜三七挥发油为主要原料的软膏、栓剂和乳剂等制剂的研究,开展生产工艺、功效成份检测和毒理学、功能学、稳定性、卫生学试验,建立先进的生产工艺和质量标准,建设中试生产线,生产姜三七挥发油相关剂型。