[01145738]肿瘤外周微环境酸性变化对前列腺癌转移过程的影响

肿瘤的转移分多个步骤进行,包括肿瘤细胞脱离原位癌、迁移,侵袭、通过对细胞外基质的降解侵入血液血管和循环系统、在一个遥远的部位再生长。这一过程不仅与肿瘤的遗传背景密切相关,更受到肿瘤所在微环境的强烈影响。肿瘤血管结构和功能的改变是肿瘤微环境的生成关键因素,肿瘤血管结构和网络功能的畸变导致肿瘤局部氧气和营养的供应不足,从而导致肿瘤代谢的变化,肿瘤细胞代谢重组,其能量代谢向糖酵解转变。肿瘤细胞糖酵解的发生,以及肿瘤血管结构和网络功能畸变所导致的低灌注,使肿瘤细胞外周乳酸升高,从而使肿瘤外周呈明显的酸化。酸性肿瘤微环境不仅促进血管生成,抑制抗肿瘤免疫反应,更影响肿瘤侵袭和转移 。 本实验将PC-3前列腺癌细胞分别培养在不同pH（pH7.4,pH7.0,pH6.6）的细胞培养基中,通过体外实验,分析PC-3细胞在侵袭、迁移等转移能力上的改变;对细胞骨架肌动蛋白Actin进行染色,通过激光共聚焦显微镜观测肿瘤外周酸性微环境对细胞骨架肌动蛋白聚合的影响;通过免疫印迹实验,检测肿瘤外周酸性微环境对PC-3前列腺癌细胞Rac1蛋白活化的影响。结果发现当肿瘤外周微环境向酸性变化时,PC-3细胞的侵袭及迁移能力均显著增强（P＜0.01）;激光共聚焦显微镜观测结果提示,肿瘤外周酸性微环境促进细胞骨架肌动蛋白的聚合;免疫印迹检测结果显示,肿瘤外周酸性微环境促进PC-3细胞Rac1蛋白的活化。 所以可以推论 酸性微环境明显促进前列腺癌细胞PC-3的迁移,并促进细胞骨架肌动蛋白的聚合及Rac1蛋白的活化,提示肿瘤外周酸性微环境对PC-3细胞迁移的促进作用与Rac1蛋白活化密切相关。 本实验同时将前列腺癌细胞PC-3分别培养在不同pH（pH7.4,pH7.0,pH6.6）的细胞培养基中,通过体外实验,分析PC-3细胞在侵袭、迁移等转移能力上的改变;对活细胞进行吖啶橙染色,通过激光共聚焦显微镜观测肿瘤外周酸性微环境对细胞溶酶体定位的影响;通过免疫印迹实验及ELISA实验,检测肿瘤外周酸性微环境对PC-3细胞cathepsin B蛋白分泌的影响。结果发现当肿瘤外周微环境向酸性变化时,PC-3细胞的侵袭及迁移能力均显著增强（P＜0.01）;激光共聚焦显微镜观测结果提示,肿瘤外周酸性微环境促进细胞溶酶体由核周向细胞边缘的迁移;免疫印迹检测及ELISA实验结果显示,肿瘤外周酸性微环境促进PC-3细胞cathepsin B蛋白分泌。故同时可以推论酸性微环境明显促进前列腺癌细胞PC-3的侵袭,并促进PC-3细胞cathepsin B蛋白的分泌,提示肿瘤外周酸性微环境对PC-3细胞侵袭的促进作用与cathepsin B蛋白的分泌相关。