[01146534]转基因家蚕体系的建立与应用

家蚕是我国重要的经济昆虫。蚕桑产业已成为许多地区的支柱产业。一直以来,如何提高蚕丝的产量和品质是人们研究的热点问题。通过遗传转化技术获得转基因家蚕是解决这一问题的关键手段。在本研究中,我们应用PiggyBac转座子技术构建了转基因家蚕,建立起了转基因家蚕技术体系,包括目标基因的克隆、转基因载体的构建、显微注射以及阳性转基因个体的筛选和种群的建立。在此技术基础上,我们将E2F1转录因子整合入家蚕基因组中,并使之特异性地在家蚕后部丝腺表达。为验证E2F1对家蚕丝腺发育的作用,我们构建了两种转基因家蚕：抑制E2F1表达和过表达E2F1的转基因家蚕。研究发现,在抑制E2F1表达的转基因家蚕中,产丝量明显降低。在过表达E2F1转基因家蚕中,产丝量略有增加。这意味着,E2F1确实可以影响家蚕的产丝。此外,我们还发现,E2F1可以结合于DNA复制相关蛋白cycE的5’’UTR区域,并激活该基因的表达。该研究不仅有助于揭示E2F1在家蚕丝腺发育中的作用;更为重要的是,过表达E2F1的转基因家蚕将可望显著提高蚕丝产量,具有十分重大的潜在应用价值。