[01194290]基于QbD理念开发重楼总皂苷固体脂质纳米粒及其作用机制研究

本项目在已有实验、文献资料的基础上对陕产重楼总皂苷的提取纯化工艺进行优化,并对其进行初步的理化性质及其作用机制研究。选择纳米粒为制剂的剂型,对该制剂的处方、制备工艺、质量标准、药效学进行研究,初步开发出一种具有巨大市场潜力的新型中药制剂。本研究首先采用Box-Behnken效应面法优化重楼中重楼总皂苷的提取工艺。以乙醇浓度、提取时间及料液比为自变量,重楼总皂苷的提取率为因变量,通过对自变量与因变量的完全二次响应曲面的回归拟合,用效应面法选择最佳提取工艺,并将预测值与观测值进行比较。重楼中重楼总皂苷的最佳提取工艺参数为：乙醇浓度为62.5%、液料比为16.5、提取时间为3.0 h,通过3批验证提取工艺参数,重楼总皂苷的提取量实测值与回归模型预测值的相对误差为2.61%。使用Box-Behnken效应面法优化重楼中重楼总皂苷的提取工艺,方法简便,结果可靠,预测性良好。 其次基于质量源于设计（QbD）理念设计和开发重楼总皂苷固体脂质纳米粒。根据重楼总皂苷固体脂质纳米粒剂型及给药特点确立了目标产品概况,并根据之前的知识和经验,通过风险评估工具确定影响固体脂质纳米粒制剂学性质的关键性变量。首先应用Plackett-Burman实验设计筛选出对重楼总皂苷固体脂质纳米粒制剂学性质影响显著的关键变量,然后对筛选出的变量应用Box-Behnken效应面法进一步优化。评价了重楼总皂苷固体脂质纳米粒的粒径分布、PdI、Zeta电位、微观形态等理化性质,考察了固体脂质纳米粒体外释药情况。结果表明所制得重楼总皂苷固体脂质纳米粒平均粒径为（116.5±32.1）nm,多聚分散系数（PdI）为（0.198±0.018）,Zeta电位为（-23.6.5±0.9）mV,透射电镜显示固体脂质纳米粒呈球状分布,体外释放结果表明具有缓释效果,24 h累积释药为63.5%。运用质量源于设计（QbD）理念设计和开发重楼总皂苷固体脂质纳米粒是可行的,可确保其产品质量符合要求。最后分别对体内及体外的抑制肿瘤效果进行研究。其中体内研究对HepG2细胞的抑制作用进行研究,研究表明重楼皂苷及纳米粒组对HepG2细胞的生长抑制作用均随剂量的升高而增强。纳米粒组对HepG2细胞的生长抑制效果明显好于重楼总皂苷溶液组,具有显著性差异（P ＜ 0.05）。采用以异位皮下移植肝癌H22实体瘤小鼠为动物模型,考察了纳米粒与药物溶液的抑瘤效果,结果表明纳米粒具有较好的杀灭抗肿瘤的能力,与模型组相比较,重楼溶液组及纳米粒组TNF-α含量显著降低。通过本项目的研究将对陕西产重楼的开发和利用,扩大陕西产重楼药材的临床使用范围;丰富我国中药抗肿瘤的研究,开辟新的领域。同时采用QbD 为理念研发中药制剂可较好的解决中药制剂质量可控性差的缺点,为中药制剂的现代化提供理论支持。