[01203690]饲料中霉变毒素残留高灵敏检测-拉曼（SERS）标记免疫检测试剂盒关键技术的研发

在发生各种饲料安全事故中,由于饲料霉变产生的一些毒素如内源性激素毒素最为常见。要减小霉变毒素污染饲料对食品安全和人体健康造成的威胁,必须加强市场监管,完善检测手段。而饲料中残留的激素含量少,常规测定方法的应用受到限制。目前权威的检测方法是高效液相色谱法,但一套检测设备非常昂贵,难以大量推广、应用。而简单易行的酶联免疫吸附法的检测限过高,无法满足要求。为解决这一问题,本项目研发出一种新的检测试剂盒,可应用于饲料中激素残留的高灵敏检测。该方法集生物芯片技术,SERS纳米标记技术和免疫分析方法于一体,可达到高灵敏检测的目的。 常用的SERS免疫分析主要基于类似三明治结构的构建,生物芯片基底上的俘获抗体和纳米粒子上的标记抗体通过与抗原的结合形成“俘获抗体-抗原-标记抗体”三明治夹心复合物,通过对标记分子SERS信号的检测进行免疫分析。早前的研究主要集中在蛋白质、DNA、微生物检测等方面,这些待测物质一般具有多个结合位点。而小分子物质比如激素类药物,由于其缺少多个结合位点,传统的三明治结构不适合[5]。最近,一种操作简单,灵敏度高的激素类小分子物质的检测方法被提出[6]。在该检测方法中,采用竞争性的表面增强拉曼散射（SERS）标记免疫技术,使待检测的小分子化合物和基底上的抗原偶联物竞争性地结合SERS纳米探针表面的克伦特罗抗体。通过检测拉曼标记分子SERS信号强度的降低,达到间接检测目标小分子化合物的目的：功能化的金纳米粒子上修饰了拉曼标记分子和玉米赤霉烯酮的抗体。当加入游离的玉米赤霉烯酮时,游离的玉米赤霉烯酮会和玻片表面固定的玉米赤霉烯酮竞争性的结合金纳米粒子上的玉米赤霉烯酮抗体,导致SERS信号的变化。这种方法检测线低（1pg/mL）,检测范围宽（1~1000pg/mL）。同HPLC等检测方法相比,本项目中所证实的检测方法操作简单,不耗费时间,仪器的价格便宜,对操作人员的专业要求低。