[01213185]一种分离纯化皮肤表皮干细胞的方法
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生物医药
类型:
非专利
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技术详细介绍
本发明公开了一种分离纯化皮肤表皮干细胞的方法,在皮肤组织块培养过程中采用自行设计的培养基能有效抑制成纤维细胞的生长,从组织块四周生长出均一的上皮样细胞,诱发表皮干细胞迁移出原来的微环境,在新生成的上皮样细胞层上重新聚集生长。这类克隆性生长的细胞与其共生的上皮样细胞有明显形态学上的差别。借助解剖镜和玻璃针就能将其挑选出来,进行单独扩增培养。对所获得细胞进行当前同行公认的表皮干细胞分子标志的检测:CK19,β1-integrin,P63,α6-integrin均为阳性,即证明所分选的是纯化的表皮干细胞。本发明克服了传统酶消化法的缺点,直接利用干细胞的生物学行为获得纯化的表皮干细胞,可用于人类和哺乳动物表皮干细胞的分离纯化。
本发明公开了一种分离纯化皮肤表皮干细胞的方法,在皮肤组织块培养过程中采用自行设计的培养基能有效抑制成纤维细胞的生长,从组织块四周生长出均一的上皮样细胞,诱发表皮干细胞迁移出原来的微环境,在新生成的上皮样细胞层上重新聚集生长。这类克隆性生长的细胞与其共生的上皮样细胞有明显形态学上的差别。借助解剖镜和玻璃针就能将其挑选出来,进行单独扩增培养。对所获得细胞进行当前同行公认的表皮干细胞分子标志的检测:CK19,β1-integrin,P63,α6-integrin均为阳性,即证明所分选的是纯化的表皮干细胞。本发明克服了传统酶消化法的缺点,直接利用干细胞的生物学行为获得纯化的表皮干细胞,可用于人类和哺乳动物表皮干细胞的分离纯化。