[01214047]畜禽疫病新型诊断技术与产品创制

畜牧业是关系国计民生的重要产业,传染病防控是畜牧业健康发展和国家安全的根本保障。长期以来,由于原始创新不足、制备工艺落后等原因,无法满足诊断早、快、准和高通量要求。加强自主创新,推进诊断技术提档升级,是保障养殖业和公共卫生事业健康发展的重大举措。团队在国家和省部级重大项目支持下,取得如下创新： 创新点一、创新了反应组份集成、冻干和结果显色工艺,创建了猪肺炎支原体等13种畜禽病原的可视化等温扩增快速检测方法和试剂盒。创新了反应组份集成、冻干工艺,4℃冷链运输和保存有效期长达1年以上;创新了等温扩增反应产物直接显色工艺,结果直接判读,检测过程仅需一步移液和一台恒温加热器,操作简捷,气溶胶污染风险小。创建了高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪肺炎支原体等13种畜禽病原的可视化环介导等温扩增快速检测方法和试剂盒,用时不超过1小时,敏感性达到1拷贝/μl,获得国家一类新兽药证书2项,为提升养殖场和基层兽医站等防疫体系末端的畜禽疫病快速发现能力提供了有力的技术和产品支持。 创新点二、突破了核酸提取和试剂预混工艺瓶颈,创制了非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒,已首批通过中国动物疫病预防控制中心组织的应急评价并广泛应用,为非洲猪瘟疫情防控做出了重大贡献。发明了病原核酸一步提取法,实现了裂解、核酸释放及稳定化的高效协同;突破了引物、探针和酶等试剂预混稳定性不足的工艺瓶颈,试剂完全预混;实现一步提取、一步移液,检测用时缩短至40分钟内。创制的非洲猪瘟病毒荧光PCR快速检测试剂盒已首批通过中国动物疫病预防控制中心组织的应急评价和抽样检测,累计检测样品逾1000多万份,销售额逾1.27亿元,在非洲猪瘟病毒核酸检测试剂领域的销量位居行业第一,为我国非洲猪瘟疫情的有效控制做出了重大贡献。 创新点三、解决了多靶标同步扩增反应组份间干扰等问题,创建了多种常见传染病鉴别诊断和高通量检测技术和试剂盒。解决了多组引物、探针等背景值及相互反应干扰,创建了能同时检测猪12种常见病原的多重荧光定量PCR检测方法和试剂盒、同时检测牛4种消化道病毒的四重荧光定量PCR检测方法和试剂盒等,1小时内完成多种病原的检测,提高检测效率和降低成本多达6倍左右。通过优势抗原诊断靶标挖掘和单抗制备等,建立了敏感性和特异性均很好的畜禽常见传染病ELISA抗体检测方法和试剂盒9种。 项目团队共创制了畜禽重要疫病现场快速诊断技术、精准鉴别和高通量检测技术和试剂盒28种,获得国家发明专利11项、国家一类新兽药证书2项,发表论著56篇（部）。近三年,诊断技术和试剂盒产品推广应用累计检测样品1500万份,为诊断制品生产企业创造直接经济效益逾1.64亿元,为畜禽养殖企业减少经济损失120多亿元,有力提升了我国动物防疫体系末端发现能力和动物疫情快速感知识别能力,在非洲猪瘟等重大动物疫情防控中做出了重大贡献,社会经济效益十分显著。