[01226415]Sa抗原的提取纯化及抗Sa抗体的检测和应用

任务来源：山西省教育委员会科技开发项目（研究类）。类风湿关节炎诊断尤其是早期诊断，是全世界风湿病学界一直致力研究的热点、难点。1994年，Despres[10]等发现了抗Sa抗体，认为对RA的特异性高达98.9%，且在早期RA患者中阳性率为23.5%。该课题的目的在于解决Sa抗原的稳定性及Sa抗原的进一步纯化的方法，确定蛋白电泳的条件和免疫印迹反应条件，完成抗Sa抗体的检测，进行大样本临床应用研究，得到一个满意的结果，尽早应用于临床工作，使RA的早期诊断成为可能，产生较好的社会效益和经济效益。该课题将抗Sa抗体大样本检测应用于RA及其他风湿性疾病的临床早期诊断，通过阴离子交换柱层析法及亲和层析法进行进一步纯化Sa抗原，在世界上首次用亲和层析纯化后的Sa抗原通过免疫印迹法对进行了抗Sa抗体检测，并通过对2466例风湿性疾病患者（其中1142例RA患者）进行了抗Sa抗体检测，结果提示：纯化的抗原具有较好的稳定性，亲和层析纯化后的抗原用于免疫印迹法检测抗Sa抗体，可以提高结果读取的准确性，提高检测效率。抗Sa抗体可用于RA的诊断，与其它RA相关自身抗体联合检测可提高对RA的诊断价值。抗Sa抗体可出现于肯定RA病程一年以内的患者。因此该抗体检测对早期RA具有一定的敏感性和较高的特异性。该课题创新之处在于首次用阴离子交换层析法及亲和层析法纯化的Sa抗原对临床RA和非RA患者大样本进行了检测，同时联合APF、AKA、抗CCP抗体及RF的大样本检测，提高了对RA诊断的敏感性和特异性。通过临床大样该研究，证实抗Sa抗体有助于RA早期诊断的指标，使病人能得到及时诊断和治疗，从而改善病人的预后。同时对早期关节炎、关节痛的患者提供确实可靠的诊断指标，最终为开发试剂盒提供理论依据。该研究已基本成熟，适用于RA早期诊断。存在问题及改进意见：进一步提高抗原纯度，达到ELISA对抗原包被的要求，作为临床常规检测方法。