[01237685]西宁市食源性金黄色葡萄球菌流行病学研究

(1)本研究从西宁市4个区域采集共计169份食品样品,利用传统分离培养、PCR以及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术进行了金黄色葡萄球菌的分离鉴定。结果表明：采用3种方法共分离鉴定出金黄色葡萄球菌121株,检出率为71.6%,表明食品污染处于相对较高水平;采用3种不同检测方法对金黄色葡萄球菌进行鉴定,相比传统分离方法,本研究建立的检测金黄色葡萄球菌特有的耐热核酸酶nuc基因的PCR方法敏感、简便,MALDI-TOF-MS技术快速、准确,鉴定结果分值在2.445-2.451之间,从分子水平为金黄色葡萄球菌的检测提供了新方法。 （2）本研究利用PCR对121株分离株进行A、B、C、D、E5种金黄色葡萄球菌主要肠毒素基因型检测,结果显示：共检测出73株产肠毒素菌株,检出率为60.33%,其中,SEA型6株,SEB型65株和SEE型2株,以肠毒素B分布最广,未检测出肠毒素C型和D型;同时发现,食品来源和种类不同,肠毒素基因型的分布情况也不同,菌株来源与其携带肠毒素的基因型密切相关。 （3）利用RT-qPCR技术在mRNA水平对金黄色葡萄球菌A、B、E3种肠毒素基因及耐热核酸酶nuc基因在不同生长阶段的相对表达量进行研究,同时以16sRNA基因作为内标基因。结果显示：不同基因型的金黄色葡萄球菌在不同来源、不同种类的食品中的表达水平有显著差异。SEA与nuc基因的表达规律基本一致;SEB与nuc基因的表达相反;SEE基因与nuc基因的表达则呈现一致状态,其中SEB高表达且差异显著。