[01253299]道地药材黄芪的新活性成分关键技术研究--黄芪糖蛋白的分离、纯化及鉴定

一、 项目来源与背景

项目名称：道地药材黄芪的新活性成分关键技术研究—黄芪糖蛋白的分离、纯化及鉴定;

项目编号：2009011013-1

项目来源：山西省自然基金项目;

免疫抑制剂被广泛用于治疗器官移植抗排斥反应和自身免疫性疾病。但是，目前所用各类药物在抑制机体免疫反应的同时，都会产生较大的毒副作用。因此，研究开发高效、低毒的新型免疫抑制剂是众多专家一直关注的热点。

糖蛋白广泛存在于生物体内，是一类具有多种生物学活性的结合蛋白，目前用于临床且具有高效免疫活性的蛋白制剂大多都是糖蛋白。山西道地药材黄芪，素以“补气诸药之最”著称，是常用的补气固表中药材之一，对机体免疫功能具有双向调节作用。以往对黄芪的研究主要集中在多糖、皂苷、黄酮及其活性方面，其免疫活性研究结果也均为增强作用。

鉴于蛋白制剂在临床上的广泛应用和黄芪特有的“双向调节作用”， 多年来，本项目组致力于对黄芪免疫活性的研究，从黄芪水提液中分离得到一种新的活性成分—黄芪糖蛋白（AmGP，HQGP），经药理学初步研究证明，具有明显的免疫抑制作用，且抑制作用呈现出剂量依赖性。

这一研究结果为本课题组首次发现，“黄芪糖蛋白”亦为本课题首次提出，相关研究成果已申请国家专利。

二、 技术原理及性能

该项目以山西浑源黄芪为研究对象，采用缓冲液浸提，离心、透析，利用蛋白纯化系统，经多种柱层析进行纯化，得2种单一糖蛋白（AmGP-1、AmGP-3）；通过HPLC、GC、EC、SDS-PAGE电泳及全自动氨基酸分析仪等方法对所得单一黄芪糖蛋白进行了纯度鉴定和组成分析，并对其结构做了初步探索。

其结果为：所得单一黄芪糖蛋白均呈淡棕色片状结晶，易溶于水；分子量分别为16 kD 和31kD，含有18种氨基酸和葡萄糖、阿拉伯糖等单糖；糖与蛋白肽链连接点为O-糖肽键；药理研究显示，具有明显的免疫抑制作用，且抑制作用呈现出剂量依赖性。

三、技术的创造性与先进性

该项目发现并获得了一种具有免疫抑制活性的黄芪糖蛋白。

四、技术的成熟程度，适用范围和安全性

该项目采用现代中药提取分离、纯化技术，从黄芪中提取分离得到一种具有免疫抑制作用的黄芪糖蛋白，建立了黄芪糖蛋白稳定、可行的提取分离纯化工艺。

五、应用情况及存在的问题

本项目的研究改进了植物活性糖蛋白的提取方法，发现了传统中药的新功效，为提高中药黄芪综合利用率，增加产品附加值及探讨中医药的作用机制提供实验依据。对充分发挥中医药优势，积极从中药中寻找新的免疫活性成分，研发新的免疫调节药物有着十分重要的意义。

本项目需进一步对黄芪糖蛋白的药效进行深入研究。

六、历年获奖情况

2012年获得山西省科技厅自然基金项目优秀。