[01294152]从长白山中药成份资源样品库中筛选抗乳腺癌药物

2005年1月～2007年10月蒙吉林省科技厅应用基础研究基金的资助，吉林大学药学院作为承担单位，东北师范大学遗传与细胞研究所作为协作单位共同完成该项课题研究。本课题属于基础研究领域，合同编号为200505179。我们围绕抗乳腺癌中药有效部位和单体的筛选，药物引起MCF7细胞的凋亡及其机理进行了该课题的系统研究。　　本研究的特色、先进性及意义为：　　1、建立一种独特的抗乳腺癌中药筛选技术平台，填补国内外空白。我们建立一种先用简单、成本低的方法筛选能引起作为靶标的肿瘤细胞死亡但对正常细胞影响较小的中药有效部位和单体，再用复杂、成本高，但结果特异的方法确认凋亡的发生，最后研究中药有效部位和单体引起凋亡的机理的独特筛选方法。解决了样品量大，耗时、耗力和由此带来的经费不足等问题，达到国内领先水平；　　2、经过多重筛选得到两种引起MCF7凋亡的中药有效部位和单体。本研究采用荧光显微镜、流公式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳三套检测相结合的方法，通过检测荧光强度、细胞周期、凋亡小体多项凋亡相关指标，筛选鉴定凋亡的发生。保证了结果的准确性；　　3、在MCF7细胞中，发现了新的凋亡路径。首次发现人参皂甙诱导人乳腺癌细胞MCF-7细胞系凋亡可能是通过抑制NF-κB的活化，从而阻断NF-κB抗凋亡通路的信号传导，达到抑制Bax等凋亡抑制蛋白的表达来实现的。这一结果迄今无人报道，达到了国际先进水平；　　4、与其他癌细胞的凋亡路径对比，找出形成差异的原因和规律，为后续研究奠定基础。对比结果表明，多数含有caspase3的癌细胞发生凋亡主要是通过激活caspase3和由此引发的caspase级联反应实现的。