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“农药残留快速检测靶标酶-胆碱酯酶制备技术研究”系天津市高等学校科技发展基金项目(合同编号:20100612),是农药残留快速检测中关键酶的应用技术研究。
胆碱酯酶是农药残留快速检测的关键用酶,然而由于胆碱酯酶不宜储藏、酶活力不稳定因素制约了农药残留酶抑制法快速检测技术的发展。
本课题通过胆碱酯酶的筛选研究,寻找合适的酶活力贮藏方式和方法,使得得到的胆碱酯酶酶活力稳定、耐藏。
主要论点与论据:由鸡血清和敏感家蝇蛆提取纯化的胆碱酯酶活力较高,制剂均可用于蔬菜中农药残留的快速测定;保藏温度为-20℃,添加0.1﹪硫柳汞可以很好地保持酶液的酶活力。
以大孔径阴离子(OH-)交换树脂为载体,用离子结合法制备得到的两种固定化酶活力比较高。
创新点:筛选出2种廉价易得且酶活力相对较高的酶原;采用贮藏温度为-20℃,添加0.1﹪硫柳汞玻璃瓶分装保藏,以大孔径阴离子交换树脂为载体固定胆碱酯酶可以很好地保持酶活力。
该研究有助于食品安全领域中农药残留的快速检测技术使用并推广;进一步纯化胆碱酯酶并且使得该蛋白质定位为以后农药残留检测技术的精确性和灵敏性提供保障。
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