[01311114]登革病毒通用型Th-CTL表位肽嵌合疫苗研制和免疫学效应研究

登革病毒（DENV）特异性Th细胞（CD4+ T细胞）和CTL（细胞毒性T细胞,CD8+ T细胞）具有保护效应。我们合成了登革病毒1型（DENV-1）的23条候选T细胞表位,竞争性肽结合实验和MHC-肽复合物稳定性实验证实4条候选Th表位同HLA-DR具高结合力（NS4b172-184IMLLILCTSQILL受HLA-DR4、DR7、DR8限制,NS3218-230RTLILAPTRVVAS受HLA-DR3、DR4、DR8、DR13、DR15限制,C44-56MKLVMAFMAFLRF受HLA-DR1、DR15限制,NS3266-278FTMRLLSPVRVPN受HLA-DR8、DR11限制）,3条候选CTL表位（NS4a140-148GLLFMILTV,NS2a144-152QLWAALLSL和NS4b183-191LLMRTTWAL）受HLA-A2限制,6条CTL表位（NS4b159-167VVYDAKFEK,NS2b15-23SILLSSLLK,NS5561-569 ALLATSIFK,NS5505-513 GVEGEGLHK,NS399-107AVEPGKNPK和E39-47PTLDIELLK）受HLA-A11限制,5条CTL表位（NS4a40-48AYRHAMEEL,NS5880-888DYMTSMKRF,NS3472-480QYIYMGQPL,NS3548-556 SYKVASEGF和NS322-30IYRILQRGL）受HLA-A24限制;ELISPOT实验和CTL杀伤实验证实DENV-1感染的人外周血单个核细胞可以识别上述表位;ELISPOT实验,流式细胞术和CTL杀伤实验表明上述14条CTL表位免疫HLA-A2、A11、A24转基因小鼠均可诱导CTL反应;我们将编码上述18个Th表位和CTL表位以及之前鉴定的1条CTL表位（NS4b40-48TLYAVATTI）和2条Th表位（NS323-35YRILQRGLLGRSQ和NS3141-155NREGKIVGLYGNGVV）的核苷酸序列克隆入pcDNA3.1（+）质粒制备成了登革病毒多表位DNA疫苗;ELISPOT实验和CTL杀伤实验证实此DNA疫苗免疫HLA-A2、A11、A24转基因小鼠可产生针对每条CTL表位的CTL反应。此DNA疫苗具广泛人群覆盖率和潜在应用前景,可产生重要的经济和社会效益!