[01338470]盐酸克伦特罗酶免疫检测试剂盒的研制

该项目为国家“十五”科技重大专项“食品安全关键技术研究”中“兽药残留检测技术研究”（2001BA804A17-9）的一部分。克伦特罗俗名：瘦肉精，化学名称为 (Clenbuterol，CL)又名双氯醇胺，氨哮素，克喘素，是一种人工合成的β2-肾上腺素受体激动剂，临床上一般应用其盐酸盐。CL在动物体内具有吸收快、分布广，脂溶性高以及具有残留性积累及半衰期长等药理特性。人在食用残留有CL肉品后引起中毒事件不断发生。在香港，1997年5月，17名居民因食用残留有CL的猪内脏而出现手指震颤、头晕、心悸、口干、失眠等症状。CL中毒在我国大陆地区也屡有发生，2001年11月7日广东省河源市690多名市民食用猪肉后发生中毒，这是迄今为止国内同类事件中中毒人数最多的一起。2001年8月22日广东省信宜市500余人出现“瘦肉精”中毒症状。另外，在上海、北京、浙江、河北及河南等地也有中毒的报道。为了充分治理和有效监管盐酸克伦特罗的非法使用，除了健全法律、法规，严格限制CL在动物中的应用外，精确、快速的检测方法是确保这些政策法规有效实施的有力武器。免疫分析技术具有敏感、特异、快速且一次能检测大量样品的特点，检测精度可达ng/g级。主要有放射免疫技术(RIA)，酶免疫技术(EIA)，试纸条检测技术，免疫生物传感器技术及时间分辨荧光免疫分析技术等。其中应用最广泛的为酶免疫分析技术。这些技术已被国际上许多实验室应用HPLC、GC/MS等色谱技术确证，目前欧盟及美国等国家将酶免疫分析技术作为“筛选法”，用于盐酸克伦特罗的宰前尿检，血检及屠宰场现场检疫手段，而将GC/MS分析法作为“确证法”，用于盐酸克伦特罗检测的仲裁和最终确证，为执法部门提供有力证据。我国农业部也颁布饲料中CL测定的限制性标准(NY438-2001)，规定HPLC和GC/MS为CL的“确证法”(仲裁法)。酶免疫技术(EIA)的工作原理为竞争性抗原抗体结合反应。在反应系统中被检样品中CL与酶标记CI共同竞争酶标板上的CL抗体位点，反应达到平衡后，洗去未结合的CL及酶标CL，用相应的酶底物显色根据样品孔与标准孔的颜色对照判定结果。因此，研制一套比较完整的药物残留检测试剂盒对动物源食品中兽药残留的监控，对保护国内消费者健康、促进畜产品出口等方面均具有非常重要的经济和社会意义。其主要技术性指标： 1. 检测灵敏度 ＜ 0.1ppb 2. 检测时间≤ 1.5hr 3. 检测重复性 CV＜ 10% 4. 检测范围0.1～25ppb 5. 有效期 6 个月（2～8℃） 6. 检测准确性 与HPLC、TCL无显著性差别。 7. 交叉反应率 ＜ 20% 8. 组织样品前处理≤2hr，无需使用C18柱。