[01371995]骆驼蓬抗老年痴呆药效物质基础与开发利用研究

运用中医药学、化学、药理学、分子生物学理论和技术,对骆驼蓬开展综合研究,主要取得如下结果： （1）从骆驼蓬种子中分离得到51个化合物,其中12个新化合物、2个新天然产物。阐明了骆驼蓬中生物碱、黄酮、氨基酸和脂肪酸的时空累积规律,为药材的最佳采收期的确定奠定了基础。 （2）明确了Harmine （HAR）, harmaline （HAL）, harmane （HAM）和vasicine （VAS）等为抗老年痴呆和止咳祛痰平喘药效的主要活性成分。 （3）阐明了HAR、HAL、HAM、VAS的体内、外代谢机制及药代动力学过程和特征,首次证明HAL在体代谢生成HAR为一条重要的减毒增效途径。建立了同时测定HAR、HAL、HAM、VAS及其24种代谢产物的UPLC-ESI-MS/MS分析方法,并应用于药代动力学研究,为代谢产物药代动力学研究提供了研究思路和方法。β-咔啉类生物碱为CYP3A4和CYP2D6的底物,HAM和harmol对CYP3A4有很强的抑制活性,而HAR和HAL对CYP1A2酶蛋白和基因表达均具有诱导作用。阐明了骆驼蓬生物碱代谢性药物相互作用机制。 （4）采用血脑屏障（BBB）转运细胞模型及微透析技术,阐明了HAR、HAL透过BBB的转运规律和机制。骆驼蓬生物碱体外对MAO的抑制能力比对AChE强（97.5倍）。但体内HAR对纹状体中Ch和γ-GABA的产生呈现浓度依赖性抑制作用 （p=0.03）。HAR和HAL进入体内后优先选择作用于AChE。骆驼蓬生物碱等主要 通过抑制海马及皮层AChE活性发挥促进学习与记忆能力的作用。同时可通过抑制抑制乳酸脱氢酶的释放、减少细胞凋亡的产生,增加GSH含量及抑制凋亡因子Caspase-3的产生,促进Egr-1, c-Jun和c-Fos 基因和蛋白的表达等发挥细胞保护作用。 （5）通过育种、移栽实验表明,骆驼蓬、骆驼蒿、多裂骆驼蓬均可发芽、出苗生长,但只有骆驼蓬适应新疆的生长环境,仍需对骆驼蓬的生长环境进行深入研究。 （6）建立了骆驼蓬子和骆驼蓬草质量标准制,并向国家药典委员会提交了质量标准草案及其起草说明。研究结果发表SCI论文20篇,中文核心期刊论文15篇;申请专利4项（2项获授权）。培养博士后1名、博士生5名（获学位2名）,硕士生11名（获学位7名）。 本研究阐明了驼蓬生物碱止咳祛痰平喘、抗老年痴呆药效学的物质基础和作用机理。