[01383680]一种新型人胸腺肽α1高效表达方法的研究

胸腺肽是胸腺组织分泌的具有生理活性的一组多肽,在调节和增强人体细胞免疫功能上具有重要作用,但鉴于其提取工艺复杂且来源有限的问题,近几年获得胸腺肽的研究转向生物技术制药的方法,典型的就是利用基因工程表达。普通的原核表达由于后期的纯化工艺复杂,不适合工业化生产,因此,寻求一种更适合工业化生产的工艺势在必行。本研究首次借助一种高效生产重组蛋白的细菌生物反应器,此反应器是用E. coli作宿主菌,经E. coli毒素MazF诱导后则使细胞内总蛋白的合成急剧下降,导致完全的细胞生长抑制。当编码目的蛋白的基因被改造而转录无ACA的mRNA时,则它的转录物可在MazF诱导的细胞中稳定地共表达并被翻译,且没有明显的背景细胞蛋白合成,形成一个只生产目的蛋白,而没有其他蛋白合成的E. coli生物反应器,目的蛋白质占总蛋白的比率可提高到 30%。而且,这一系统成本低廉,因为SPP系统中细胞不生长,细胞培养物在蛋白质生产过程中会被浓缩,即可使培养物浓缩40倍,蛋白质收率也不会改变,可以降低97.5%的成本而不损失收率。特别是SPP系统不仅可以高效表达蛋白质,而且也可以进行蛋白质结构研究。利用高浓缩培养物使SPP系统成本显著降低,一个含有150个残基氨基酸的蛋白质的全合成只需耗费45美元,这对于真核蛋白质的结构和功能研究具有重要意义。这一方法不仅为胸腺肽表达提供了一个全新高效的蛋白质表达系统,而且可以对蛋白质的结构分析提供一个新颖的途径。本研究通过以胸腺肽主要活性成份胸腺肽Tα1基因为研究对象,利用E. coli毒素（MazF）诱导的表达系统经优化获得了一条高效生产胸腺肽α1的方法,为胸腺肽α1的生产提供一条新的途径,可广泛用于研究和企业生产的需要,提高经济和社会效益。