[01385037]能诱导抗胃癌免疫的重组抗独特型抗体的筛选及鉴定
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化学药物
类型:
非专利
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基于免疫网络学说的抗独特型抗体(抗-Id)瘤苗的研究是近年肿瘤免疫学领域中的一个热点。胃癌是一种高发病率和死亡率的恶性肿瘤,能否用抗-Id来有效防治,目前尚不清楚。本项目对此问题进行了初步探讨。所获主要结果如下:⑴ 以鼠抗人胃癌单抗MG7、MGb1和MGd1分别免疫Balb/c小鼠,取脾分离mRNA,成功构建了相应的三个噬菌体抗体ScFv文库;⑵以三株单抗分别对相应ScFv文库进行四轮亲和淘选,使三个文库均得到了有效富集;⑶经ELISA从相应富集文库中分别筛选出24个MG7-阳性克隆、18个MGb1-阳性克隆、17个MGd1-阳性克隆;⑷针对上述阳性克隆,经竞争ELISA分别筛选出5个、4个和3个能够抑制相应单抗与初始抗原结合的噬菌体单克隆,这些克隆所呈现的为β或γ型抗-Id ScFv;⑸. 针对上述呈现β或γ型抗-Id ScFv的噬菌体克隆,对相应抗-Id ScFv进行了可溶性表达;⑹上述噬菌体呈现型和可溶性抗-Id ScFv中,有的可诱导小鼠产生抗人胃癌免疫力;这些结果为获得胃癌抗-Id疫苗候选分子和深入探讨用重组抗-Id防治胃癌奠定了基础。
基于免疫网络学说的抗独特型抗体(抗-Id)瘤苗的研究是近年肿瘤免疫学领域中的一个热点。胃癌是一种高发病率和死亡率的恶性肿瘤,能否用抗-Id来有效防治,目前尚不清楚。本项目对此问题进行了初步探讨。所获主要结果如下:⑴ 以鼠抗人胃癌单抗MG7、MGb1和MGd1分别免疫Balb/c小鼠,取脾分离mRNA,成功构建了相应的三个噬菌体抗体ScFv文库;⑵以三株单抗分别对相应ScFv文库进行四轮亲和淘选,使三个文库均得到了有效富集;⑶经ELISA从相应富集文库中分别筛选出24个MG7-阳性克隆、18个MGb1-阳性克隆、17个MGd1-阳性克隆;⑷针对上述阳性克隆,经竞争ELISA分别筛选出5个、4个和3个能够抑制相应单抗与初始抗原结合的噬菌体单克隆,这些克隆所呈现的为β或γ型抗-Id ScFv;⑸. 针对上述呈现β或γ型抗-Id ScFv的噬菌体克隆,对相应抗-Id ScFv进行了可溶性表达;⑹上述噬菌体呈现型和可溶性抗-Id ScFv中,有的可诱导小鼠产生抗人胃癌免疫力;这些结果为获得胃癌抗-Id疫苗候选分子和深入探讨用重组抗-Id防治胃癌奠定了基础。