[01417436]成纤维细胞生长因子治疗增生性瘢痕及机制研究

1. 揭示FGF对增生性瘢痕病变的作用,并进一步探索FGF在增生性瘢痕发病中的具体分子机制。 我们证实bFGF调控与增生性瘢痕成纤维细胞相关mRNA的表达,抑制TGF-β1/SMAD信号通路,抑制该通路下游信号蛋白的磷酸化。在大鼠急性创面模型中,我们证实bFGF通过调节炎症反应、TGF-β1蛋白表达、细胞的增殖和迁移,促使肉芽组织中胶原蛋白合成和沉积,加速创面再上皮化,促进肌纤维母细胞的凋亡,减少疤痕形成,促进创面的愈合。同时,我们在兔耳增生性瘢痕模型中,证实bFGF 抑制增生性瘢痕组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达,在蛋白水平抑制TGF-β1 和α-SMA 的表达,从而抑制瘢痕的产生（PLOS one 2013）。同时我们阐明bFGF对高糖环境下成纤维细胞迁移的影响及机制,表明bFGF可以通过产生微量ROS促进细胞迁移,并通过Akt-Rac1-JNK信号通路影响细胞迁移,本研究对于理解糖尿病情况下bFGF对皮肤创面的促愈合作用有较重要的意义 （Int J Bio Sci, 2015）。此外我们在临床上证实压疮等难愈性创面中心存在大量细胞凋亡、生长因子表达下降,为生长因子应用于压疮提供了理论基础 （J Wound Ostomy Continence Nurs 2012, Spinal Cord, 2014）。我们还发现FGF除了促进糖尿病溃疡愈合以外,还可以促进毛囊增生 （Biomed Res Int 2014）。 2. 开发针对增生性瘢痕的FGF新制剂。 1) 已完成稳定型aFGF基因克隆及高表达基因工程菌株的构建,实现了蛋白可溶性表达。菌体湿重达80g/L发酵液,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的达到30.0%以上。已完成原液及缓释凝胶剂中试生产工艺优化和质量标准建立。 2) 蛋白收率达200mg/L发酵液,高效液相纯度≥98.0%,比活性≥2.5×105IU/mg;并有效地解决了FGF药物N末端不稳定,质量控制难的问题。 3) 已完成规范化的药效学研究,药效学实验表明：aFGF凝胶剂对化学性糖尿病（I型糖尿病）模型和遗传性糖尿病（2型糖尿病）模型皮肤创伤有非常显著地促进作用;治疗1型和2型糖尿病皮肤创伤,rhaFGF最低用量应不低于每平方厘米创面30U（30U/cm2）。 4) 重组人酸性成纤维细胞生长因子糖尿病足治疗技术已转让安徽鑫华坤生物工程有限公司,技术成果转让价款和技术服务费用总额为1000万元。