技术详细介绍
本科研团队利用Red重组系统和位点特异性重组技术，无痕敲除了野生型大肠杆菌染色体上的ldhA、adhE、pflB、 poxB、ackA、mgsA、aspC和sfcA基因，结合进化代谢育种技术，筛选获得低盐条件下可高产琥珀酸非转基因大肠杆菌工程菌。所得菌株可利用NBS培养基和AM1低盐培养基，其成分主要为多种无机盐，成本远低于LB培养基；并且可以高效转化工业废弃玉米浆和葡萄糖结晶废糖液，目前在国内外尚属首例。所获得的工程菌，可在厌氧条件下发酵，48 h后琥珀酸产量达到92 g/L，糖酸转化率为89%，无杂酸生成。其中mgsA、aspC和sfcA基因敲除为国内首次敲除成功，我科研团队的研究已达到国际先进水平。所构建菌株无添加质粒，在发酵过程中不需加入抗生素等，菌株抗诱变能力强，发酵工艺简单，糖酸转化率较高为89%，且无杂酸生成。（6）我科研组提供所构建菌株，应用于工业生产，在提高工业生产琥珀酸产量的同时，可以降低工业成本（利用成本较为低廉的工业玉米浆等原料），提升琥珀酸的质量标准，为有机药物、石油等行业服务。（7）琥珀酸可作为绿色化学制品和材料的中间物质，具有广阔的应用前景。然而传统的化学法生产琥珀酸成本高，环境污染严重，无法达到可持续发展的要求。因此若能利用工业废弃物，高产琥珀酸则是现今的最热门的课题。
2012年本成果经湖北省科技厅鉴定为国际先进水平。