[01434905]浙江特产中药三叶青核心种质构建及其多倍体种质资源创新技术研究

三叶青是浙江等少数省份独有的抗肿瘤、抗肝损伤的珍稀药用植物,其野生资源濒危,且人工栽培难度大,药材市场上伪混品众多,品系混杂。建设药用植物核心种质资源库并加强优选优育可以为保护中药种质和遗传资源,防止品种退化,解决品种源头混乱的问题提供一条出路。目前国内外对三叶青的研究主要集中在临床应用、化学成份以及药理作用、驯化技术方面,而三叶青种质资源库的构建、质量评价指纹图谱的建立、种质资源的鉴别、保存、评价及新品种的选育技术除本项目工作外尚未见报道。 本项目探索了ISSR、CAPS分子标记技术以及ITS2 条形码在三叶青与其常见伪品以及近缘植物种质鉴别中的应用,在此基础上,开发了一种基于CAPS分子标记技术的三叶青及其伪混品快速鉴别方法;采用 HPLC法建立可作为其药材质量评价的三叶青黄酮类成分的专属性指纹图谱;以有效成分为首选指标,结合生长量指标、DNA分子标记等数据构建核心种质资源库;选取核心种质中的优良品种探索了其多倍体品种诱变技术,确认了三叶青二倍体的染色体数目和倍性;通过适宜的培养条件和合理的抑制剂、破眠剂使用,建立三叶青种质资源离体保存、保存后复苏培养技术体系。 项目建立了三叶青黄酮类成分的专属性指纹图谱,为三叶青药材的质量控制以及实际生产中指导其规范化种植与饮片炮制提供依据;构建了三叶青核心种质资源库,为三叶青种质资源的保护和遗传育种奠定基础;并选育出有效成分含量高、药材产量高的优良三叶青品系。