[01549512]育阴灵冲剂对自然流产免疫因素调控作用的研究

1.科学技术领域-育阴灵冲剂对自然流产免疫因素调控作用的研究项目，是生殖健康领域的热点、难点，属于国家科技发展纲要的重点病种研究领域。该研究方向是支持中医妇科学国家重点学科的研究方向之一；是国家重点专科专病的优势病种；是拓展国家中医临床研究基地名老中医经验传承和创新思想的重要内容。2.主要内容-课题组是在全面了解国内外对免疫性复发流产研究现状的基础上，采取多学科交叉，利用免疫组化、PCR技术、酶联免疫法，对名老中医临床经验方“育阴灵”治疗免疫复发流产、诱发排卵方面进行研究，(包括临床、实验及药物安全性)。旨在揭示该药治疗复发性流产有效性的作用机理，证明中医药的优势，以利于推广应用。(1)实验研究1)建立自然流产动物模型将雌性CBA小鼠分别与雄性DBA/2和BALB/c小鼠按2:1合笼交配，建立免疫性复发流产模型CBA×DBA/2和正常妊娠模型CBA×BALB/c。将受孕的CBA小鼠随机分为模型组、中药组、西药组(每组10只)2)检测外周血母-胎免疫指标①采用单向混合淋巴细胞反应分析孕鼠外周脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力；②用RT-PCR分析细胞CD4+、IL2mRNA的含量以研究脾脏细胞母-胎免疫耐受状态；③采用流式细胞术测定外周血免疫细胞CD4、CD8。3)采用免疫组化和PCR技术进行定位和定量检测蜕膜组织免疫细胞，CD4+、CD8-及CD4+T细胞的两个亚群Th1/Th2，及其之间的平衡性，同时检测Th1型细胞因子分泌干扰素γ(IFN-γ),Th2细胞主要分泌白细胞介素-2(IL-2)。4)采用了放射受体分析方法，测定了育阴灵对小鼠子宫雌、孕激素受体的影响,并观察对子宫、卵巢的增重作用的影响。(2)育阴灵安全性研究1)急性毒性试验给昆明小鼠灌胃，育阴灵的剂量达到成人口服剂量的288倍未引起小鼠死亡。2)长期毒性实验用Wister大鼠对育阴灵进行长期毒性试验分高、低剂量组及对照组，连续灌胃给药3个月，观察大鼠一般状况、血液流变学指标、血液生化指标；并进行解剖和病理组织学观察，然后进行精密称重，计算脏器系数。(3)临床研究将符合免疫复发性流产纳入标准和排除标准的120例患者，随机分为中药治疗组与西药对照组。治疗后分别观察临床症状、保胎成功率、抗体转阴率。3.特点及应用推广情况：1)利用现代科研技术对名老中医的经验方进行系统研究，这对临床科研一体化的应用具有实际意义和推广价值。2)育阴灵治疗免疫复发性流产疗效优于同类药物，且安全性高，毒副作用甚小。3)该方已被国家规划教材《中医妇科学》多次收录，并在临床广泛应用，与此相关研究文章发表在SCI和国内核心期刊等杂志20余篇，多次在国内外学术会议上进行发言，在全国中医学界有着较大的影响。