[01555369]七鳃鳗口腔腺分泌蛋白抗血栓应用研究

该项目所属领域：生物技术领域。主要内容：该课题组于2002年在国际上率先开展了七鳃鳗功能基因组学与蛋白质组学的研究工作,构建了七鳃鳗肝脏、口腔腺、血液cDNA文库，并于口腔腺中发现了一条含有三个RGD（Arg-Gly-Asp）模体的Lj-RGD3（鳗溶素）蛋白。由于RGD模体能与血小板糖蛋白GPIIb/IIIa专一性结合，竞争性地拮抗纤维蛋白原与血小板的结合，防止血小板的活化和GPIIb/IIIa受体构象的改变，阻断受体与多种配体的结合，抑制血小板聚集的最终共同通路，所以含RGD模体的毒素蛋白具有抗血栓形成功能。该项目对Lj-RGD3进行了分子克隆后，对其重组蛋白rLj-RGD3进行了中试放大生产及抗血栓药理药效学及毒理学研究。具体包括：rLj-RGD3基因重组蛋白中试发酵工艺优化、抗血栓的药理药效学试验、出血倾向的比较性研究、急性毒性试验、注射用rLj-RGD3的安全性研究。结果表明：①rLj-RGD3中试发酵条件稳定；②rLj-RGD3具有显著抗栓作用，对血凝参数TT、PT、APTT无影响，对全血血流变、血浆血流变无影响，但对血小板聚集抑制作用显著；③rLj-RGD3毒性轻微，在抗血栓剂量范围内无毒性。④rLj-RGD3对血管无刺激、不引起溶血反应，也不诱发过敏反应，是一个高效低毒的抗血栓候选药物。项目特点：以往对七鳃鳗的研究工作主要集中在分类学、解剖学、神经生物学和免疫学方面，该项目对七鳃鳗功能蛋白的抗血栓药理药效学研究在国际上尚属首例。鳗溶素有望成为具有中国自主知识产权的一类新药。成果及应用推广情况：包括在各类学术期刊上发表的二十余篇论文，其中SCI收录十篇。专利申请八项，获授权四项。已与两家企业联合进行鳗溶素医药中间体的中试放大、蛋白冻干粉生产，年产经济效益2000万。