[01566218]莪术油不良反应与抗病毒作用毒---效关系研究

国家食品药品监督管理局第7期《药品不良反应信息通报》发布后,莪术油注射液的用药安全引起了政府、医院、制药企业和广大患者的高度关注。从上市多年的临床使用表明,莪术油尤其在治疗小儿病毒性肺炎等方面有许多优点,补充了国内抗病毒药物市场的不足,但过敏反应的高发率严重制约了临床继续使用。本项目试图分析莪术油中的抗病毒有效成分,主要成分在体内的代谢及其毒性反应,主要成分的血管生成组织修复作用,为探讨莪术油的安全使用提供实验依据。课题获得了浙江省中医药管理局科研基金的资助。项目取得的研究成果： 1、对莪术油体外抗病毒的部位进行了初筛,发现其对流感病毒有较好的抑制作用,但莪术油与”达菲“和”病毒唑“相比安全性较差,即具有细胞毒作用。 2、莪术油体外对科萨奇B3病毒没有抑制作用,通过体外实验不能说明莪术油临床用于治疗病毒性心肌炎的抗病毒作用。 3、莪术油小极性溶剂部位对乙型肝炎病毒复制未表现出抑制活性,而大极性部位有抗乙型肝炎病毒复制的活性,作用不及对照药lamivudine,但比lamivudine具有较好的安全性。 4、运用LC-MS,LC-UV对莪术油经灌胃给药的大鼠血中移行成分进行了初步分析,在灌胃莪术油后大鼠血浆中检测到莪术油主要成分莪术醇、莪术二酮。同时还检测到2种成分,但结构未能确定,有待于进一步分析。在同期的尿液样品中检测到4种成分,但结构未能确定。对同期的粪便也进行了分析,但未能发现有意义的结果。 5、对莪术二酮的体内代谢产物进行了初步分析,从血中发现2个代谢产物。 6、通过色谱分离从温郁金乙醇提取物的乙酸乙酯部位（莪术油的主要部分）分离得到5个新的倍半萜化合物,对其结构进行了鉴定,对相对立体构型通过X线单晶衍射和核磁共振谱进行了确定,其中2个化合物结构新颖,1个为带有过氧桥的愈创木烷型倍半萜,1个为裂环的愈创木烷型倍半萜,这些化合物均呈现出较好的抗流感病毒A的作用。 7、6个化合物进行了体外对流感病毒神经氨酸酶抑制作用分析,结果显示对流感病毒神经氨酸酶有一定抑制作用,抑制率为57%-91%,提示莪术油的抗流感病毒作用与抑制神经氨酸酶的活性有关。 8、以斑马鱼为模式,对莪术油的主要成分莪术醇的毒性从胚胎发育、斑马鱼自主运动、心率、运动行为等方面进行了分析,结果提示莪术醇对斑马鱼胚胎发育自主运动、心率及神经系统均有影响。 9、运用1H NMR技术,对莪术二酮的毒性进行了代谢组学分析,并通过组织病理学、肝功生化为辅助,发现长期口服莪术二酮对肝脏有一定程度的损伤,毒性机制可能与影响肝线粒体代谢有关。 10、建立了运用LC-MS技术研究莪术二酮药代动力学的方法参数,并对静脉注射莪术二酮在家兔体内的代谢动力学进行了分析。结果莪术二酮t1/244.04,MRT0-t 23.12,MRT 0-∝27.49,AUC0-t 47884.62,AUC 0-∝870 5.91 。 11、发现了莪术醇具有促进血管生成的作用。1α,8α-epidioxy-4α-hydroxy- 5αH-guai-7（11）,9-dien- 12,8-olide具有抑制血管生成作用。