[01594125]安全、高效的三疣梭子蟹四倍体诱导技术的研究
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技术详细介绍
[1] 三疣梭子蟹受精过程的细胞学观察：23 ～ 25 ℃下，自然产出三疣梭子蟹卵第一和第二极体分别在卵产出后30 ～ 45 min和1.5 ～ 3 h释放；卵产出后5.5 ～ 6 h，合子处第一次核分裂后期；卵产出后11 ～ 13 h，观察到表面卵裂。 [2] 孵育水温与三疣梭子蟹受精卵发育同步率的关系：23 ℃下卵裂同步率最高达82.5%。 [3] 三疣梭子蟹四倍体诱导起始时刻的确定：23 ℃下三疣梭子蟹产卵后9 h为处理最佳起始时刻。 [4] 温度休克诱导三疣梭子蟹四倍体的研究：细胞松弛素B（C.B.）处理诱导四倍体的效果（四倍体率 = 40.5 ± 2.3 %）好于温度休克法，冷休克诱导效果（四倍体率 = 33.8 ± 13 %）好于热休克。 [5] 化学处理诱导三疣梭子蟹四倍体的研究：6-DMAP处理诱导四倍体的效果最好（四倍体率 = 50.9 ± 13 %），KCl次之（四倍体率 = 40.2 ± 5.2 %），二者均可以取代剧毒、价昂的CB，而且6-DMAP处理组的成活率也较高。 [6] 在总结三疣梭子蟹四倍体人工诱导试验结果的基础上，撰写了“温度休克诱导三疣梭子蟹四倍体的操作规程”和“化学处理诱导三疣梭子蟹四倍体的操作规程”。