[01598235]赤芍颗粒调控HBV感染免疫耐受期患者免疫通道的研究

该课题获2018年度广西高校中青年教师基础能力提升项目资助。 慢性乙型肝炎(CHB)是由乙型肝炎病毒(HBV)感染引起的一种难治性疾病，根据世界卫生组织的数据，全球约20亿人感染过HBV，其中3.5亿为慢性HBV感染者。持续的HBV感染是造成肝脏损害的根本原因，但抗病毒治疗难以收到预期疗效，每年仍有约100万人死于HBV慢性感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝癌。免疫系统对HBV及其抗原反应低下或无应答(免疫耐受)是引起HBV慢性感染的关键因素，乙肝病毒感染的免疫耐受是慢性乙肝难治的主要原因之一。打破乙肝病毒感染免疫耐受已成为慢性乙肝治疗的关键。根据HBV侵害人体肝脏的特点，提出乙肝病毒感染的免疫耐受“肾虚肝郁毒聚”中医病机假说，采用“补肾行气解毒”治法，以《医林改错》膈下逐瘀汤化裁形成“赤芍颗粒”治疗乙肝病毒所致的慢性肝损伤、免疫耐受等，临床取得良好效果。相关研究结果显示，树突状细胞(DC)通过抗原递呈活化CD8+T淋巴细胞为细胞毒性T淋巴细胞(CTL)，发挥抗乙肝病毒作用，同时DC通过其分泌的IL-12会进一步促进DC功能的发挥，增强CTL的杀伤作用，因此DC-IL-12-CTL免疫通道在抗乙肝病毒感染免疫中发挥着极为重要的作用。该研究以HBV免疫耐受患者为研究对象，设同期平行对照，采用FACS法、免疫组化、ELISA、RT-PCR、Western-blot等技术检测用药前后机体DC-IL-12-CTL免疫通道中相关分子的表达和功能的变化情况，探讨其打破乙肝免疫耐受的作用，为补肾行气解毒法防治慢性乙肝提供理论依据。 该课题选取60例符合纳入标准的HBV感染免疫耐受期患者，按照随机数字法分为治疗组及对照组各30例，治疗组给予赤芍颗粒治疗，对照组给予中药安慰剂治疗。治疗结束后比较两组患者CD80、CD86、HLA-DR、IL-12、CD8+T细胞数及血清HBV-DNA水平变化情况。结果显示，疗程结束后，治疗组CD80、CD86、HLA-DR、IL-12、CD8+T细胞数及血清HBV-DNA水平均有明显改善，且明显优于对照组，差异具有统计学意义。显示赤芍颗粒能显著改善免疫耐受期患者CD80、CD86、HLA-DR、IL-12、CD8+T细胞数等免疫指标，抑制HBV-DNA复制，打破CHB免疫耐受，安全性良好；其机制可能与DC/IL-12/CTL免疫通道的激活有关。该研究为中医药打破乙肝免疫耐受的立法组方提供实验依据。研究结果已在国内专业学术期刊上发表相关论文3篇，为该方的临床推广应用提供循证依据。 该课题创新点：①治疗措施“赤芍颗粒”来源于中医经典理论及方药指导，结合临床实际而成。②为慢性乙肝免疫耐受期患者提供了新的具有实验依据的治疗方法。③采用现代临床研究方法，设计随机平行对照；疗效评价指标采用分子生物学方法、免疫学方法进行检测和评价，为中医药临床应用提供了方法学依据。存在不足：因经费不足，研究样本量不够大，且一些指标未能按计划完成。展望：继续深入研究，争取高级别项目立项，获取充足经费；选用DC-IL-12-CTL免疫通道的新指标如DCs(mDC、pDC)、CD83、IL-12p70、HLA-DR基因表达、HLA-DR13蛋白表达进行疗效评价，以提高疗效评价的准确度。