[01665012]苯甲酸利扎曲普坦膜剂的处方研究及含量测定

简要技术说明及主要技术性能指标　　任务来源：“苯甲酸利扎曲普坦膜剂的处方研究及含量测定”是唐山工人医院承担的2008年河北省唐山市科学技术研究指导计划项目，课题编号为08130227B。　　应用领域和技术原理：偏头疼是反复发作的一种搏动性头疼，属众多头疼类型中的“大户”。它发作前常有闪光、视物模糊、肢体麻木等先兆，约数分钟至1小时左右出现一侧头部一跳一跳的疼痛，并逐渐加剧，直到出现恶心、呕吐后，感觉才会有所好转在安静、黑暗环境内或睡眠后头疼缓解。在头痛发生前或发作时可伴有神经、精神功能障碍。同时，它是一种可逐步恶化的疾病，发病频率通常越来越高。据研究显示，偏头疼患者比平常人更容易发生大脑局部损伤，进而引发中风。其偏头疼的次数越多，大脑受损伤的区域会越大。苯甲酸利扎曲普坦（rizatriptan benzoate）是新型口服有活性的5-HT受体阻滞剂，口服生物利用度高，起效快，在2h内可显著减轻或完全消除偏头痛，恢复患者的正常功能并提高生活质量，且不良反应低。目前国内、外已经上市的剂型主要为普通片剂、口崩片和胶囊，规格有5、10mg，而其口腔用膜剂尚未见文献报道。膜剂与现有剂型比较，具有快速溶解、快速释放的特点，同时方便吞咽困难和老年患者用药，以及具有携带方便等优势。　　本研究为筛选苯甲酸利扎曲普坦膜剂最佳处方，按照正交设计试验进行处方辅料用量的选择，以处方的溶化时限、含量均匀度和柔软性为考察指标，确定膜剂最佳处方，同时进行稳定性考查及含量测定，以有效控制药品质量。　　主要研究内容：2006年至2008年进行了文献检索和课题论证及制剂制备试验、方法筛选。　　（一）处方研究　　1、材料：　　苯甲酸利扎曲普坦（云南省昆明市全新生物制药有限公司）；支链淀粉浙江湖州展望食品化工有限（上海浦力膜医药科技辅料发展有限公司香料厂）；其它试剂均为分析纯。78-X型片剂四用测定仪（上海黄海药检仪器厂）UV-1601紫外分光光度计（日本岛津公司）。　　2、方法　　2.1 膜剂的制备　　取聚乙烯醇加水浸泡使其充分溶胀后，置于80～85℃水浴中加热至完全溶解。另取支链淀粉研磨后加入上述溶液中，在搅拌充分的条件下，加入主药，最后加入甘油，搅拌均匀后，放置去泡，制成膜剂，取适量进行中间体含量测定，根据主药含量切成标准张，紫外线灭菌30min，包装于无菌袋中。　　2.2 正交试验设计　　经预试验研究发现影响苯甲酸利扎曲普坦膜质量的主因素为成膜材料聚乙烯醇17-88的用量（A）、增塑剂甘油的用（B）、填充剂支链淀粉的用量（C）。其中，每种因素各取3水平正交设计因素水平见表1。　　2.3　质量评价　　2.3.1　含量均匀度（S）　　取本品按照2005年版《中国药典》（二部）附录相关方法进行测定，并求得标准偏差（s）。　　2.3.2　溶化时限（T）　　取本品6张，分别用两层筛孔内径为2·0mm的不锈钢丝夹住，照崩解时限检查法进行检查，应在15min内全部溶化，并能通过筛网。其中，15min内全部溶化为50%，15～30min为30%，30min以上为20%。　　2.3.3　柔软性（E）　　膜剂柔软性考查，主要根据脱膜的难易（最易脱膜记分为10）、膜的韧性（最好评分为20）和抗拉性（拉力最大记为20）进行考察，总值为50。　　2.3.4 结果　　用综合评分的方法评价膜剂的质量，综合评分=T+E-S。　　2.4 正交试验　　按照因素水平表，以L9（34）进行正交设计试验。选取T、S和E为质量评价指标，试验结果见表2。　　对正交试验结果进行方差分析，结果见表3　　由表2和表3可知，影响苯甲酸利扎曲普坦膜剂质量的因素为A，即聚乙烯醇17-88的用量，而支链淀粉与甘油影响较小。即符合膜剂要求的处方为A2B2C3和A2B3C1，二者处方再结合T、S及E值，最终确定处方为A2B2C3。　　3、稳定性试验　　将膜剂分别于光照（4500±50）Lx、高湿（相对湿度92.5%和75%）、高热（30℃和20℃）条件放置10d。结果显示，本品对光照及高热条件稳定，但在高湿度条件下产品容易变软。取用模拟上市包装的膜剂样品3批，置于（20±2）℃条件下放置0、3、6、9、12mo进行考查。结果表明，外观、含量、T等各项指标无明显变化，表明本品放置1a质量基本稳定。　　4、结果　　筛选的最佳处方组成中聚乙烯醇17-88为55%，甘油为10%，填充剂支链淀粉为20%。室温稳定性考查12mo，各项指标未见明显变化。　　（二）含量测定：　　1、仪器与试药　　UV-1601紫外分光光度仪（日本岛津制作所）。苯甲酸利扎曲普坦对照品（精制品，本院药物实验室提供）；苯甲酸利扎曲普坦膜剂（本院药物实验室提供，批号： 071212、071216、071218）。　　2、方法与结果　　2.1 溶液配制　　2.1.1 对照品溶液配制　　　精密称取苯甲酸利扎曲普坦对照品约10mg，置20ml容量瓶中，加0.1mol·L-1盐酸溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml置50ml容量瓶中，加0.1mol·L-1盐酸稀释至刻度。　　2.1.2 空白辅料溶液配制　按处方量制备空白膜剂，取1片置200ml容量瓶中，加0.1mol·L-1盐酸适量，超声振荡30min，放冷，加0.1 mol·L-1盐酸稀释至刻度。微孔滤膜（0.45μm）过滤，弃去初滤液，得续滤液。　　2.1.3 供试液制备 　　取待测苯甲酸利扎曲普坦膜剂1片（相当于苯甲酸利扎曲普坦7.267mg），剪碎，置小烧杯中。加0.1 mol·L-1盐酸10ml，55℃水浴10min，同时轻振摇后放置5min，将溶剂上清液转入200ml容量瓶中，换0.1 mol·L-1盐酸10ml，同法操作后，将溶剂上清液转入同一个容量瓶中，如此反复5次后，用0.1mol·L-1盐酸定容摇匀即得。　　2.2 波长选择　　取2·1·1和2·1·2制备的两溶液，于200～400nm进行紫外扫描，结果见图1。选择280nm作为测定苯甲酸利扎曲普坦吸收度的波长。　　图1　苯甲酸利扎曲普坦及空白辅料的紫外扫描图　　a·苯甲酸利扎曲普坦；b·空白辅料　　2.3 标准曲线的制备　　取苯甲酸利扎曲普坦对照品约50mg，精密称定，置50ml容量瓶中，用0.1 mol·L-1盐酸溶解并稀释至刻度，得对照品储备液，加0.1mol·L-1盐酸稀释至250μg·mL-1溶液。分别精密量取1、2、4、6、8、10ml于50ml容量瓶中，用0.1mol·L-1盐酸稀释至刻度，于280nm处测定其吸收度A，将所得吸收度A对相应浓度C（μg·mL-1）进行回归分析，得回归方程为：A=0.01468C+0.001629，r=0.9999。表明苯甲酸利扎曲普坦溶于0.1mol·L-1盐酸溶液中，当浓度在5.28～52.7μg·mL-1其A值与浓度C呈良好线性关系。　　2.4 稳定性试验　　取浓度为36.8μg·mL-1的对照品溶液，于0、1、2、4 h测定吸收度A，得平均吸收度为0.546,RSD=0.10%，表明样品在操作条件下4h内稳定。　　2.5 回收率试验　　取50ml容量瓶9个，分别加1片空白膜剂。精密加入储备液6、7.5、9ml各3份，用0.1 mol·L-1盐酸稀释至刻度，超声溶解，滤过，取续滤液于280nm处测定吸光度，计算回收率，平均回收率99.75%，RSD=0.20%。　　表1 回收率试验测定结果（n=9）　　样号 测量药液（ml） 回收率（%） 平均回收率（%） RSD（%）　　1 6 99.4 　　　99.75%　　0.20%　　2 6 99.7 　　3 6 99.5 　　4 7.5 99.9 　　5 7.5 100.0 　　6 7.5 99.9 　　7 9 99.6 　　8 9 99.5 　　9 9 99.9 　　2.6 样品测定结果　　根据溶出曲线及中国药典2005年版二部附录14的有关规定，测定计算每片中苯甲酸利扎曲普坦含量。3批样品的含量分别为99.6%±0.2%、98.7%±0.1%、100.1%±0.3%，符合中国药典2005年版两部规定。　　3、结果 　　3.1 本研究筛选的最佳处方组成中聚乙烯醇17-88为55%，甘油为10%，填充剂支链淀粉为20%。室温稳定性考查12mo，各项指标未见明显变化。　　3.2 苯甲酸利扎曲普坦在5.28～52.7μg·mL-1吸收度与浓度呈良好线性关系，A=0.01468C+0.001629，r=0.9999，平均加样回收率为99.75%，RSD=0.20%。　　创新性结论：　　苯甲酸利扎曲普坦易溶于水，可制成膜剂。选用聚乙烯醇作为成膜材料，因其具有易溶于水、成膜性能好、粘结力强、热稳定性高等优点，同时对黏膜无毒、无刺激性，口服后在消化道内很少吸收，80%的聚乙烯醇在48h内随大便排出。而选用支链淀粉作为填充剂，系因为其不但具有掩盖药物味道作用，同时具有一定的成膜性能。另外适量的甘油作为增塑剂，能够有效地保障膜剂具有一定地柔软性。经过正交试验得到的苯甲酸利扎曲普坦膜剂，处方组成简单、工艺易于操作，质量稳定。　　紫外－可见分光光度法是根据被测量物质分子对紫外－可见波段范围（150～800纳米）单色辐射的吸收或反射强度来进行物质的定性、定量或结构分析的一种方法。本研究建立了紫外－可见分光光度法测定苯甲酸利扎曲普坦膜剂含量的方法，研究表明苯甲酸利扎曲普坦在220、280nm处有两个吸收峰。空白辅料在250～400nm范围内无吸收峰，但在220nm左右有一定的吸收，若在此范围内选择吸收波长，有可能影响吸收度的测定，因此选择280nm作为测定苯甲酸利扎曲普坦吸收度的波长。甲酸利扎曲普坦溶于0.1 mol·L-1盐酸溶液中，当浓度在5.28～52.7μg·mL-1其A值与浓度C呈良好线性关系。由线性曲线可知，浓度为36.8μg·mL-1的苯甲酸利扎曲普坦盐酸溶液在280nm处的吸收度约为0.5，苯甲酸利扎曲普坦膜剂每片含苯甲酸利扎曲普坦7.267mg，故应选用200ml溶剂进行苯甲酸利扎曲普坦膜剂的稀释液。从以上试验可以看出，用紫外分光光度法测定苯甲酸利扎曲普坦膜剂含量方法简便，数据准确、可靠，可有效控制药品质量。　　与国内外同类研究的综合比较：　　苯甲酸利扎曲普坦（rizatriptan benzoate），化学名称 3-［2-（二甲基氨基）乙基］-5-（1，2，4-三氮唑-1-甲基）吲哚苯甲酸盐，是近年发展的第二代曲普坦类（triptans）偏头痛治疗药物，是继舒马曲坦、那拉曲坦（naratriptan）和佐米曲坦（zolmitriptan）之后上市的第4个曲坦类抗偏头痛药物，尚未被国内外药典收载。该药由Merck公司研制，1998年在荷兰上市，临床用于治疗急性偏头痛发作，具有起效快、疗效好、安全方便的优点，我国正在开发研究中。　　目前国内、外已经上市的剂型主要为普通片剂、口崩片和胶囊，规格有5、10mg，而其口腔用膜剂尚未见文献报道。膜剂与现有剂型比较，具有快速溶解、快速释放的特点，同时方便吞咽困难和老年患者用药，以及具有携带方便等优势。我们采用正交试验对苯甲酸利扎曲普坦膜进行了处方筛选和稳定性研究，开发了苯甲酸利扎曲普坦膜剂，为患者提供了治疗偏头痛的又一安全、有效、方便的治疗药物选择。　　该课题经河北省科学技术信息研究所（国家一级科技查新咨询单位）于2008年5月完成查新。该课题经手工检索、光盘检索、联机检索等手段，从中国科技成果数据库、中文科技期刊数据库、中国报刊科技新闻数据库、中国学术会议论文数据库、中国学位论文库、中国专利文献数据库、万方数据库、中国医学文摘、国家科技成果网以及部分网上资源，检索到相关文献多篇，但未检索到密切相关文献，得出的结论是：本课题对苯甲酸利扎曲普坦膜进行了处方筛选和稳定性研究，开发了苯甲酸利扎曲普坦膜剂，在国内文献中未见相同报道。　　关键技术与创新点　　技术关键：　　苯甲酸利扎曲普坦膜质量的主要因素为成膜材料聚乙烯醇17～88的用量、增塑剂甘油的用量、填充剂支链淀粉的用量。本研究按照正交设计试验