[01735419]α4β7受体拮抗剂对HIV-1靶向治疗的分子机制及应用研究

课题来源：该项目任务来源于2010年1月广西科技厅科技计划项目，合同编号：桂科攻10124001B-13；项目类别：科技攻关与新产品试制;项目名称：人口健康与食品安全关键技术研究与开发；课题名称：α4β7受体拮抗剂对HIV-1靶向治疗的分子机制及应用研究。研究背景：近年对人类免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus,HIV)发病机制研究催生出肠道是HIV感染的主要病灶的新观点。国内外对整合素α4β7在HIV肠道感染中的作用研究尚处于初级阶段，而且由于HIV感染的动物模型难以建立限制了对它的进一步的研究。课题组研究发现人肠道组织的淋巴细胞高表达整合素α4β7，据此提出阻断整合素α4β7可以降低HIV-1的复制。该研究结果必将为探索HIV新的发病机制和HIV的治疗提供新的突破口，以及把整合素α4β7作为研究靶点发掘新的药物，有望拓宽抗HIV治疗药物的种类。研究内容与意义：项目从三个方面进行了研究：1.对桂北地区部分HIV感染者血液标本的HIV-1毒株env区进行了基因序列测定和分型。2.使用流式细胞仪对外周血和肠道组织CD3+CD4+T淋巴细胞分选的建立，通过检测外周血和肠道组织CD3+CD4+T淋巴细胞整合素α4β7表达率，从分子水平为肠道作为人免疫缺陷病毒感染主要部位提供依据。3.分析桂林市HIV感染者血常规、生化指标及CD4、CD8+T细胞的检测结果,为桂林艾滋病防控提供科学依据；探讨高效抗逆转录病毒治疗（HAART）对不同临床类型HIV-1感染者血清IL-23、IL-27、IL-32水平的影响；观察HIV-1阳性病人血清白细胞介素-18（IL-18）和白细胞介素-18结合蛋白(IL-18BP)的水平与疾病的关系，探讨抗病毒治疗对其的影响。研究结果表明：1.通过对桂北地区80例HIV感染者的HIV-1病毒进行基因序列分析比较，发现以CRF08-BC亚型为主，提示广西桂北地区HIV感染者HIV-1基因亚型存在多样性。2.对15例结肠癌患者肠道组织中CD3+CD4+T淋巴细胞的整合素α4β7检测，提示α4β7表达水平高于外周血相应的淋巴细胞亚群，高表达CD3+CD4+T淋巴细胞整合素α4β7可能是肠道感染HIV的主要基础，有关研究结果为艾滋病的靶向治疗的实施提供了新的思路。3.观察到478例HIV感染者血清IL-18、IL-18BP水平及IL-18/IL-18BP失衡与艾滋病的发生发展有关。动态监测外周血IL-18及IL-18BP水平可作为反映HIV-1感染患者的免疫功能状态变化指标，调节体内IL-18及IL-18BP水平的平衡可能为艾滋病的治疗提供新的途径。早期进行高效抗逆转录病毒治疗（HAART）可能降低IL-18/IL-18BP失衡的程度。创见与创新：该研究用感染者的抗凝全血样品,提取前病毒DNA,用巢氏PCR扩增病毒膜蛋白ENV基因的C2～V3区基因区段,对PCR纯化产物进行测序,并应用GCG软件等对序列进行分析，为广西HIV-1基因分型研究提供原始资料和依据，填补了桂北地区HIV-1基因分型研究的空白；用流式细胞仪对外周血和肠道组织CD3+CD4+T淋巴细胞分选的建立，通过检测外周血和肠道组织CD3+CD4+T淋巴细胞整合素α4β7表达率，从分子水平为肠道作为人类免疫缺陷病毒感染主要部位提供依据，在国内为首次报道并建立了分选外周血和肠道组织CD3+CD4+T淋巴细胞可靠而稳定的新方式。项目公开发表相关论文11篇，培养医学硕士4名。社会效益：该课题利用流式细胞仪分选HIV感染的特异性的CD4+T淋巴细胞，可为在体外使用共培养的方式建立HIV的感染模式提供靶细胞，为HIV的深入研究提供新的途径；研究还介绍了一种适用于基层医疗机构的快速、准确、简便和低成本的HIV基因分型和核酸检测方法。该项目的研究与推广应用，为艾滋病病情和防控新方法提供了可靠的理论及实验依据，促进了广西艾滋病领域的研究，显现了重要的经济效益和社会效益。存在问题：有必要进一步研究α4β7在HIV急性感染期、潜伏期、前期及典型感染期的表达情况及其受体拮抗剂对HIV感染的影响。