[01763705]人类疱疹病毒6型南京株的生物学、免疫学和相关疾病研究

人类疱疹病毒6型（HHV-6）是引起婴幼儿急疹（ES）的病原，在成年人常以恶性淋巴增生性疾病为主要表现。HHV-6主要侵犯CD4＋淋巴细胞，其致病机理不清，国内研究几乎空白。　　1994年我们从临床诊断为婴幼儿急疹（ES）急性期11例及9例淋巴增生疾病晚期患者外周血单个核细胞分别分离培养病毒6株和2株。8株病毒均稳定传代30代以上，对分离阳性株采用病毒学、细胞学、免疫学、分子生物学鉴定，证实全部为HHV-6 B亚型。构建了HHV-6自分离株CN5株基因组文库，并对部分核酸序列测定。该片段全长4600bp，与基因数据库中已登记的HHV-6标准株和各地方株同源性比较，与Z29达98.1%，与GS株达81%。此结果证实了自分离株属HHV-6 B亚型，在氨基酸序列的同源性比较也证实了CN5在分类上更接近HHV-6 B亚型。PCR及Southern Blot杂交均出现阳性条带。　　免疫学特征：　　(1)GS株和自分离株均可在体外诱生高水平IFN-α、TNF-α、IL8，不产生IL6，早期能诱导产生IL10，后期IFN-γ和IL12增高。特别HHV-6感染能诱生IL8至今国内外未见报道，HHV-6能诱生IL10、IL12和国外同时期报道。CN8体外感染早期可明显增强NK活性；　　(2)GS株和CN5、CN8体外感染淋巴细胞对CD抗原表达的影响，发现二者有差异。两者对CD2表达无影响；CD4抗原表达明显增强；CD3抗原表达下降。GS株对CD45RA、CD8表达降低，而CN5、CN8无影响。GS株CD4＋/CD8＋比值升高，而CN5株CD4＋/CD8＋比值无明显升高，说明HHV-6A和HHV-6B自分离株在CD抗原表达上有差异。　　结合临床研究，用自分离株建立免疫组化染色法、IFA、PCR三种方法检测临床相关疾病333例，发现和口腔鳞状上皮癌、淋巴瘤有相关性，而和白血病无相关性。　　结论：　　自分离的南京株HHV-6具有良好的应用前景和价值。　　(1)为我国HHV-6疫苗研制提供了南京候选株；　　(2)HHV-6检测临床标本方法学的建立和初步应用，为临床诊断和治疗疾病奠定了基础；　　(3)对其免疫特征研究及持续性感染状态建立也为研究HHV-6的致病机理进一步提供了理论依据。