[01789743]益生菌降解谷物和饲料中玉米赤霉烯酮的应用研究

本项目由江西省科技支撑计划项目资助（编号：2010BNA09300）,主要采用微生物学、生物化学、基因工程技术及动物实验等技术手段进行了细致的研究。通过深入我国粮食主产地（安徽和河南省）进行DON和ZEN的污染情况的调查采样获得样本,利用液体选择性培养基造成目标性的选择性压力,借助于间接竞争ELISA方法快速筛选和HPLC精确定量获得蜡样芽孢杆菌、藤黄微球菌、鼠李糖短杆菌、罗尔斯通氏贪铜菌、粪肠球菌等6株具有不同降解能力的菌株。其中蜡样芽孢杆菌能降解97.6﹪液体中的ZEN,在pH值为6.5的营养肉汤培养基,37℃培养96h,可以完全降解液体中的ZEN。试验也表明蜡样芽孢杆菌的上清液中存在能有效降解液体中ZEN的物质,而排除菌体细胞壁的吸附。降解ZEN毒素的产物分析表明：ZEN没有形成有毒的α-zearalenol、β-zearalenol、α-Zearalanol和β-Zearalanol中间代谢产物,表明能达到彻底除毒的效果。迄今为止,已发表学术论文10篇,其中SCI收录2篇,申报的专利2项。 本项目的创新点为： 1、研究首次筛选获得能降解ZEN的益生菌（蜡样芽孢杆菌）,研究原核生物尤其是益生菌高效降解真菌毒素ZEN的机制,及作用的物质基础是主要创新之处。 2、研制的专门用于真菌毒素ZEN降解的粗酶制剂和活菌制剂也是国内鲜有报道的。 3、在原核载体和真核载体表达的降解酶与文献报道的ZEN降解酶存在9个碱基差异,影响了蛋白的二、三级结构,但却存在相同的降解ZEN的效果。 关键技术： 1、用间接竞争ELISA和液体选择性培养基方法结合,筛选获得了有效降解真菌毒素ZEN的芽孢杆菌。 2、采用低温操作,极大地保持了芽孢杆菌上清的ZEN降解酶活性。 教育部科技查新工作站的查新结果表明：芽孢杆菌降解真菌毒素玉米赤霉烯酮研究以及降解饲料中真菌毒素玉米赤霉烯酮的酶制剂产品研究属国内首创。