[00018118]绒螯蟹属DNA数据库的构建及河蟹优良品种鉴定的研究

技术投资分析： 　　该项目来源于天津市科技计划应用基础研究重点项目，项目编号：033803511。该项目以绒螯蟹属的蟹种，特别是以不同水系以及同一水系不同种群的中华绒螯蟹为研究对象，利用稳定的PCR-RFLP技术对所研究生物的线粒体基因片段进行分析，并利用相关的计算机软件对所获得的DNA指纹图像进行收集、储存和整理，构建绒螯蟹属的RFLP指纹数据库。 该项目取得了以下研究成果： 　　1.对绒螯蟹成体样本的外部形态特征进行了判别分析，得出了绒螯蟹的分类判别公式。 　　2.利用PCR-RFLP技术对研究样本的线粒体12S-16S rRNA基因片段进行了限制性片段长度多态性分析，得出了区分合浦绒螯蟹与中华绒螯蟹、日本绒螯蟹的RFLP标记。 　　3.将分子生物学技术与计算机技术相结合，首次构建了绒螯蟹属18个群体线粒体COⅠ和细胞色素b基因片段的RFLP指纹数据库各1个。 　　4.以线粒体COⅠ和Cyt b基因片段的RFLP指纹图为基础，获得鉴别狭颚绒螯蟹和合浦绒螯蟹的RFLP标记共18个；向GenBank提交序列5条，并被释放。 　　5.采用数理统计分析方法，项目界定了绒螯蟹种间和亚种间的遗传距离，同时分析了绒螯蟹的遗传多样性和亲缘关系。 　　6.首次对中华绒螯蟹样本中混杂合浦绒螯蟹等进行了量化检测分析。当混杂样本占群体的12%时，即可以通过PCR-RFLP方法检测出来。 　　该研究项目所取得的成果在生产实践中，为苗种进行种质分析及对蟹苗纯度鉴定的提供可靠的方法；在理论上，为使中华绒螯蟹宝贵物种资源的可持续利用，必须加强对其遗传概貌研究，分析现有资源的遗传物质多样性，为中华绒螯蟹生物多样性的评价积累宝贵的基础数据，为中华绒螯蟹种质资源保护和持续开发与利用提供科学的建议。 技术的应用领域前景分析： 该项目立意良好、技术路线合理，具有重要的科学意义和理论价值，并有一定的应用前景；经专家评审，应用PCR-RFLP技术，以线粒体COⅠ和Cyt b基因片段为分析对象，系统地探讨绒螯蟹种间以及中华绒螯蟹种群间的遗传多样性，并构建绒螯蟹的DNA数据库，处于国际先进水平。 效益分析： 本技术市场广泛，成本低，利润丰厚，效益可观。 厂房条件建议： 无 备注： 无