[00284045]一种伪狂犬病毒LLT区ΔIntron株及构建方法和应用
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所属行业：
类型：
发明专利
技术成熟度：
正在研发
专利所属地：中国
专利号：CN201410323568.7
交易方式：
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联系人：
华中农业大学
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所在地：湖北武汉市
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资料保密
对所交付的所有资料进行保密
- 如实描述
技术详细介绍
摘要：本发明公开了一种伪狂犬病毒LLT区ΔIntron株及构建方法和应用，步骤是：A、Intron上下游同源臂的PCR扩增；B、转染载体的构建。将Intron基因上下游同源臂片段通过分子克隆技术克隆至pcDNA3.1(+)载体上；C、PRV-ΔIntron重组病毒的构建与鉴定；D、PRV-ΔIntron重组病毒体外培养生物学特性。将制备的伪狂犬病毒ΔIntron基因缺失毒株接种PK-15细胞；E、动物实验。将制备的伪狂犬病毒ΔIntron基因缺失毒株感染Balb/c小鼠，Intron的缺失导致其毒力大大降低。该毒株表达miRNA的区域缺失，丧失了对宿主和自身蛋白质编码基因的调控作用，导致毒力下降，具有开发成为新型疫苗的潜在价值。方法易行，操作简便，缺失区域遗传稳定，不会返强。用于制备新型伪狂犬病疫苗，预防和控制猪伪狂犬病。
摘要：本发明公开了一种伪狂犬病毒LLT区ΔIntron株及构建方法和应用，步骤是：A、Intron上下游同源臂的PCR扩增；B、转染载体的构建。将Intron基因上下游同源臂片段通过分子克隆技术克隆至pcDNA3.1(+)载体上；C、PRV-ΔIntron重组病毒的构建与鉴定；D、PRV-ΔIntron重组病毒体外培养生物学特性。将制备的伪狂犬病毒ΔIntron基因缺失毒株接种PK-15细胞；E、动物实验。将制备的伪狂犬病毒ΔIntron基因缺失毒株感染Balb/c小鼠，Intron的缺失导致其毒力大大降低。该毒株表达miRNA的区域缺失，丧失了对宿主和自身蛋白质编码基因的调控作用，导致毒力下降，具有开发成为新型疫苗的潜在价值。方法易行，操作简便，缺失区域遗传稳定，不会返强。用于制备新型伪狂犬病疫苗，预防和控制猪伪狂犬病。
