[00331960]一种猴子早期胚胎转基因敲入的PCR鉴定方法
交易价格：
面议
所属行业：
生物化工
类型：
发明专利
技术成熟度：
通过小试
专利所属地：中国
专利号：CN201510469573.3
交易方式：
资料待完善
联系人：
福州大学
进入空间
所在地：福建福州市
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-
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
- 如实描述
技术详细介绍
摘要：本发明属于分子生物学及基因工程领域，涉及一种猴子早期胚胎转基因敲入的PCR鉴定方法。含有0.2-0.5µl培养基的单个注射完的早期胚胎收集于薄壁透明PCR管底部；用枪头小心加入DLB裂解液5µl至PCR管底部，不要接触到含有胚胎的培养基；置于冰上裂解15-30min释放基因组DNA；裂解产物直接全部用于全基因组扩增反应；然后用两轮巢式PCR扩增方法进行转基因敲入鉴定。本发明的方法能稳定地对少至只有16个细胞的猴子单个胚胎进行操作，所有操作步骤一直在同一PCR管中操作，防止操作过程造成微量基因组的丢失。同时，高保真横向扩增的方法拓展了基因组的下游应用，按照此方法可稳定、准确、简便地实现对猴子单个胚胎基因组敲入的快速PCR鉴定。
摘要：本发明属于分子生物学及基因工程领域，涉及一种猴子早期胚胎转基因敲入的PCR鉴定方法。含有0.2-0.5µl培养基的单个注射完的早期胚胎收集于薄壁透明PCR管底部；用枪头小心加入DLB裂解液5µl至PCR管底部，不要接触到含有胚胎的培养基；置于冰上裂解15-30min释放基因组DNA；裂解产物直接全部用于全基因组扩增反应；然后用两轮巢式PCR扩增方法进行转基因敲入鉴定。本发明的方法能稳定地对少至只有16个细胞的猴子单个胚胎进行操作，所有操作步骤一直在同一PCR管中操作，防止操作过程造成微量基因组的丢失。同时，高保真横向扩增的方法拓展了基因组的下游应用，按照此方法可稳定、准确、简便地实现对猴子单个胚胎基因组敲入的快速PCR鉴定。
