[00377512]移植免疫诊疗体系的创新及关键技术的临床应用

人类白细胞抗原(HLA)是造血干细胞移植和器官移植中判断供受者组织相容性匹配度的最重要的靶基因，但即使在供受者HLA高分辨基因分型全相合移植中，仍然存在一定比例的急性排斥和急性移植物抗宿主病(aGVHD).课题组的研究发现NK细胞的免疫球蛋白样受体(KIR)基因是影响aGVHD的另一重要基因，以及在HLA抗体阴性的肝/肾移植中主要组织相容性Ⅰ类相关链A位点(MICA)基因是引起排斥反应的重要新分子.该项目在国家和江苏省科技项目的支持下，采用基因克隆、基因测序和基因芯片技术进行供受者的HLA、KIR、MICA高分辨基因分型及特异性抗体分型，围绕"供受者移植前的风险评估-移植中的动态监测-移植后并发症的防治"几个方面进行系列研究，取得了下列创新性的研究成果: 1、创建了适合国人选择最佳供受者的实验体系:率先在国际上提出中国汉族人群HLA-CWD基因具有独特的分布频率，与世界其他种族存在明显差异，并指出国际通用的HLA高分辨确认分型标准不适用于中国人群.在国内最早应用基因克隆和基因测序技术证实在HLA全相合的供受者中有78.4%供受者KIR基因不完全相合;及KIR2DL1/3DL1是中国人群NK细胞具有异源杀伤活性的主要抑制型受体基因和2DS4*00101是KIR-A/A单体型中最重要的等位基因型.在国内最早建立免疫磁珠流式液相芯片 (Luminex) 技术检测抗HLA和MICA特异性抗体的实验方法，最先提出受者移植前预存抗供者的特异性抗体(DSA)是移植后发生急性排斥和导致移植失败的最危险因素，项目组为中国应用HLA，KIR，MICA高分辨基因分型评估供受者匹配度的临床应用引人新的实验体系，显著降低了高危受者移植失败的发生率. 2、开创了移植后预警aGVHD和急性排斥的诊断体系:在国际上最先提出供者为完整型KIR2DS4*00101是引起移植后Ⅲ-Ⅳ度aGvHD发生的重要基因型，及移植早期2DL1和3DL1基因的mRNA高表达与aGVHD的发生呈正相关.在国内最早系统分析了供受者HLA-A，B，C高分辨等位基因错配是影响移植OS、Ⅱ-Ⅳ度aGvHD发生的重要靶基因.在国内率先报道肾移植和肝移植患者预存MICA抗体，并在体内外研究证实MICA分子是重要移植抗原参与体液免疫排斥反应.移植后动态检测抗HLA和抗MICA抗体可早期诊断和预警急、慢性排斥反应的发生.项目组解决了中国无预示aGVHD和急性排斥的特异性实验指标的难题. 3、建立了防治移植后感染和免疫干预治疗的体系:在国际上最先提出供者为KIR2DS4缺失型和KIR-B/B单体型移植后CMV感染发生率低;而供者为KIR-A/A单体型，其HSCT总体生存率明显低于供者KIR-B/x单倍体型.在国内最先提出移植后动态监测新生DSA的产生就有助于临床早期干预治疗.自主研发MICA*008重组蛋白和建立预存MICA抗体的肾移植模型并确定了新型免疫抑制剂的剂量.建立体外特异性吸附HLA-DR抗体的实验方法并验证了其吸附抗体的效率达85.71%.项目组有效提高了移植的长期生存率及具有重要的临床转化和推广应用价值. 该项研究成果在21个省、市68家三等甲级医院进行推广应用，效果良好，使12085例移植受者获益.发表论文48篇，SCI23篇，发明专利3项，获WHO命名新基因22个.是中国第一家获得国际最权威美国ASHI认证的实验室，其实验技术和移植领域都得到国际认可.该项研究成果有力推动了移植免疫的发展和引领作用.