[00382799]猪繁殖与呼吸障碍综合征乳胶凝集试剂盒

关键技术、主要技术经济指标，与国内外同类技术的比较和获奖情况： 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是近年来发现的一种新的病毒病，给中国养猪业造成巨大的经济损失。用Marc-145细胞增殖PRRSV，通过离心沉淀，透析等方法纯化病毒，用浓缩病毒液及预处理的乳胶来制备PRRSV乳胶抗原，建立乳胶凝集试验。 在该方法的建立过程中，该成果解决的关键技术问题是选择适合的抗原蛋白含量及最佳致敏条件。将浓缩后的病毒液进行蛋白质含量的测定，然后对抗原进行倍比稀释，加入预处理过的乳胶，通过改变致敏温度及致敏时间，用阳性血清进行方阵滴定，来对致敏条件进行确定。对抗原倍比稀释时发现，1∶64稀释时致敏，抗原与阳性血清反应敏感性最高，从而确定了最佳致敏的稀释度，此时抗原蛋白含量为028mg/ml。45℃致敏40min，制备致敏乳胶。该方法致敏的乳胶，在批间重复性试验测试中，得到相同的检测结果，说明了该方法重复性好。并用此乳胶抗原，与pH7.4PBS、PRRSV阴性血清、牛血清、猪布氏杆菌、猪衣原体、猪口蹄疫、猪细小病毒、猪萎缩性鼻炎、猪伪狂犬病、猪乙脑等疾病的阳性血清均不凝集，只与PRRSV阳性血清发生凝集，其特异性高。用该乳胶凝集试验与国外进口的ELISA试剂盒同步检测20个猪场181份送检血清，符合份数127份，符合率70.2%，其中阳性符合率84.9%(62/73)。用该试剂盒检测的阳性率为56.9%(103/181)比国外ELSIA检测的阳性率为40.33%(73/181)高16.67%。人工感染试验：12头免疫前LAT及BLISA结果均为阴性的猪，接种后1周，用LAT即检出阳性结果，2周后，ELSIA及LAT均为阳性，可见该试剂盒具有早期诊断的优点。 成果推广应用情况及取得的经济、社会效益：该乳胶凝集试剂盒已在华中地区推广应用，由于可快速检出PRRSV阳性猪群，使得猪场针对该病能及时采取隔离、免疫等防制措施，控制该病的扩散蔓延。取得了显著的经济及社会效益。 成果推广应用前景(包括产业化、可推广规模和其它与成果转化相关的内容等)： 由于该乳胶凝集试剂盒，重复性好，特异性强，与国外ELSIA相比，检测猪血清PRRSV抗性早。操作简单方便，且排除了酶标板上活病毒在现场检疫时有散毒的危险。该方法的建立及试剂盒的成功研制提供检测PRRSV有力的手段。 试剂盒的制备工艺已相当成熟和稳定，市场需求大，因此具备了产业化的技术条件和外部环境，因此前景是乐观的。