[00392250]重组牛生长激素基因(rBGH)在畜牧生产中的应用研究
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技术详细介绍
该项目是2004年甘肃省科学技术厅科技攻关计划项目,项目编号2GS042-A41-001-04,项目实施期间投入科研经费25万元,其中政府划拨15万元,自筹10万元。本项目首次开展了牦牛生长激素基因编码区基因序列的克隆测序和生长激素基因重组表达载体的构建研究,并对荷斯坦奶牛级进杂交群体的泌乳性能和生长性能以及GH基因、IGFBP-3 基因多态性与奶牛生产性能的相关性进行了研究。通过研究,本项目构建了牦牛生长激素基因cDNA文库,克隆出了完整的牦牛生长激素基因,并登陆了GenBank(登录号为:EF154193);构建了牦牛生长激素基因的重组表达载体PET-28a(+)/YGH并对其进行了诱导表达和条件优化,表达产物分子量约为26KDa,重组蛋白以包涵体形式存在,Western blotting试验显示该融合蛋白具有良好的抗原反应性;研究发现,GH基因第4内含子2017bp处存在C→T突变,该位点可作为影响奶牛泌乳性能的遗传标记位点之一,IGFBP-3 基因也可作为影响奶牛生产性能的候选基因。项目在牦牛生长基因cDNA文库构建方面具有一定的创新性,研究成果为重组牛生长激素在不同基因型奶牛生产中的合理推广应用,为制定不同基因型奶牛适宜的群体改良方案提供了实践和理论依据。
该项目是2004年甘肃省科学技术厅科技攻关计划项目,项目编号2GS042-A41-001-04,项目实施期间投入科研经费25万元,其中政府划拨15万元,自筹10万元。本项目首次开展了牦牛生长激素基因编码区基因序列的克隆测序和生长激素基因重组表达载体的构建研究,并对荷斯坦奶牛级进杂交群体的泌乳性能和生长性能以及GH基因、IGFBP-3 基因多态性与奶牛生产性能的相关性进行了研究。通过研究,本项目构建了牦牛生长激素基因cDNA文库,克隆出了完整的牦牛生长激素基因,并登陆了GenBank(登录号为:EF154193);构建了牦牛生长激素基因的重组表达载体PET-28a(+)/YGH并对其进行了诱导表达和条件优化,表达产物分子量约为26KDa,重组蛋白以包涵体形式存在,Western blotting试验显示该融合蛋白具有良好的抗原反应性;研究发现,GH基因第4内含子2017bp处存在C→T突变,该位点可作为影响奶牛泌乳性能的遗传标记位点之一,IGFBP-3 基因也可作为影响奶牛生产性能的候选基因。项目在牦牛生长基因cDNA文库构建方面具有一定的创新性,研究成果为重组牛生长激素在不同基因型奶牛生产中的合理推广应用,为制定不同基因型奶牛适宜的群体改良方案提供了实践和理论依据。