[00635531]非酒精性脂肪肝小鼠TLR4的MyD88和TRIF信号通路和胰岛素抵抗的相关研究

课题来源与背景、研究目的与意义：该成果来源于国家自然科学基金（合同号：81260078）资助项目。非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)发病率逐年升高，呈大众化、全球化和低龄化趋势。为西方发达国家最主要的肝病病因，中国成人脂肪肝患病高达12.5%-35.4%。NAFLD还被认为是糖尿病、代谢综合征的前期病变，诸多NAFLD发病的危险因素（肥胖、糖尿病、高血压等）迅速增加，WHO预测，到2020年非传染性疾病将占中国死亡原因的79%。但是，NAFLD的发病机制尚不完全明确，也无特殊的治疗方法，探讨其发病机制及防治方法具有深远的意义。应用高脂饮食法构建TLR4基因野生型NAFLD小鼠、油酸在人正常肝细胞LO<,2>细胞制备NAFLD的细胞模型，从体内外两个层面，观察中草药提取物青蒿琥酯对NAFLD小鼠的TLR4炎症通路的影响。课题研究探索了NAFLD的发病机制，同时表明青蒿琥酯可以作为一种潜在的用于预防非酒精性脂肪性肝病进展和发展治疗策略。青蒿素是中国具有完全自主知识产权的药物，也是中国唯一获得国际认可的抗疟新药。该成果将有助于加深对NAFLD炎症机制的理解，有望为NAFLD的治疗提供新的思路，为青蒿素的临床应用提供了一定的理论依据。课题的完成促进了肝病学科的建设；有助于对NAFLD形成机制的理解，有望为NAFLD，乃至与慢性炎症和IR相关的肥胖、2型糖尿病提供新的治疗靶点奠定理论基础，对拓宽广西特有中草药青蒿素在临床的应用提供了实验数据。主要论点与论据：理论成果：该课题从体内外两个层面，观察青蒿琥酯对NAFLD小鼠的TLR4炎症通路的影响及其与IR的关系，研究结果显示：TLR4/TRAF6/NF-κB炎症通路参与NAFLD发病，与IR产生有关；青蒿琥酯可以调节TLR4/ TRAF6/NF-κB信号通路，影响炎症因子的表达，改善肝脏组织学检查所显示的肝脏脂肪变化，与HOMA-IR相关，并呈一定的剂量-效应关系。为了深入课题研究，课题组在取得现有成果基础上，进一步研究了青蒿琥酯对TLR4/Myd88下游PI3K/Akt信号通路的影响：应用青蒿琥酯干预，研究其是否在原来研究的基础上，进一步通过TLR4/PI3K/Akt信号通路改善非酒精性脂肪性肝病。应用光学显微镜，Western印迹，Elisa，免疫荧光和二氯荧光素二乙酸酯测定等方法研究显示：青蒿琥酯能够通过TLR4/PI3K/Akt通路调节下游炎症细胞因子（TNF-α，IL-6，IL-8和IL-18）和氧化应激改善非酒精性脂肪肝疾病。创见与创新：首次观察青蒿琥酯对NAFLD的TLR4/ TRAF6/NF-κB信号通路的影响。青蒿琥酯为中国唯一专利中药，且产地在西部地区。为其在临床的推广使用提供理论依据。社会经济效益和存在的问题：经济效益：该课题为基础研究，无直接经济效益。然而，青蒿琥酯是青蒿素的水溶性衍生物，青蒿素是广西特有的中药材之一，是中国具有完全自主知识产权的药物，也是中国唯一获得国际认可的抗疟新药。该成果将有助于加深对NAFLD炎症机制的理解，有望为NAFLD的治疗提供新的思路，为推动青蒿琥酯作为NAFLD临床治疗的新药物提供理论依据。因此将可能产生较大的经济效益。社会效益：发表论文：完成论文撰写10篇，其中在国家级及以上核心期刊发表6篇，2篇正在投稿中，2篇已经初步完成撰写工作。获得其他项目资金：在该项目研究基础上，深入研究，于2013年6月（2012GXNSFAA276038）和2014年（2014GXNSFAA118152）项目组成员进一步获得2项广西自然科学基金项目共10万元的研究资金：学科建设、人才培养等社会效益：研究期间，培养硕士研究生6名，其中4个已经毕业并就业于市级及以上医院，且有2个获得国家奖学金、学校优秀硕士毕业生，发表SCI收录论文1篇。课题的完成促进了传染病学-肝病学科的建设；有助于对NAFLD形成机制的理解，有望为NAFLD，乃至与慢性炎症和IR相关的肥胖、2型糖尿病提供新的治疗靶点奠定理论基础，对拓宽广西特有中草药青蒿素在临床的应用提供了实验数据。历年获奖情况：研究期间，培养硕士研究生6名，有2个获得国家奖学金、学校优秀硕士毕业生。