[00642289]GalDH系列基因克隆及高维生素C番茄培育
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种植
类型:
非专利
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技术详细介绍
该研究从维生素C合成途径中找到三个最主要的限速酶基因,并完成了克隆、构建、转化,经过转化植株的分子杂交、DNA插入、RNA的表达检测后,进行了高VC番茄突变体的筛选,通过测定酶活性、维生素C的含量,筛选出了高维生素C新品种。该研究首次在国内克隆了GalUR、GalDH、GalLDH基因;首次在国内外把GalUR、GalDH、GalLDH基因构建到了FRO2高效表达载体上,并转化了农杆菌C58,筛选鉴定后,获得可用于转化的工程菌种3个:GalUR/PCR-302、GalDH/PCR-302、GalLDH/PCR-302;首次在国内外获得高维生素C含量的番茄植株和品种,转基因番茄的酶活性提高2倍,转基因番茄VC含量提高2.5倍;改进了全长GALUR基因的克隆和构建方法,其中二轮多重巢式RT-PCR克隆全长基因技术在国际上首创。
该研究从维生素C合成途径中找到三个最主要的限速酶基因,并完成了克隆、构建、转化,经过转化植株的分子杂交、DNA插入、RNA的表达检测后,进行了高VC番茄突变体的筛选,通过测定酶活性、维生素C的含量,筛选出了高维生素C新品种。该研究首次在国内克隆了GalUR、GalDH、GalLDH基因;首次在国内外把GalUR、GalDH、GalLDH基因构建到了FRO2高效表达载体上,并转化了农杆菌C58,筛选鉴定后,获得可用于转化的工程菌种3个:GalUR/PCR-302、GalDH/PCR-302、GalLDH/PCR-302;首次在国内外获得高维生素C含量的番茄植株和品种,转基因番茄的酶活性提高2倍,转基因番茄VC含量提高2.5倍;改进了全长GALUR基因的克隆和构建方法,其中二轮多重巢式RT-PCR克隆全长基因技术在国际上首创。