[00644950]PCR-mtDNA技术鉴别检测肉食品和饲料中畜禽源性成分的研究

针对中国畜禽类肉食品和饲料市场贸易中畜禽源性成分检验检疫中的迫切需要和关键性技术，该项目开展了应用PCR-mtDNA和SYBRGreenI实时荧光PCR-mtDNA技术鉴别检测肉食品和饲料中牦牛、鸭、鸽、鹌鹑、总禽类源性成分的研究。获得以下成果：①克隆出鸭、鸽、鹧鸪的mtDNA部分未知序列，获得三个序列号(DQ655706、EF029094、EF527259)；设计出了鉴别检测肉食品和饲料中牦牛、鸭、鸽、鹌鹑、总禽类源性成分的特异性引物；②应用PCR-mtDNA技术，分别建立了PCR-mtDNA技术鉴别检测肉食品和饲料中牦牛、鸭、鸽、鹌鹑、总禽类源性成分的方法，且检测最低限均为120pg/μlDNA；在此基础上，应用SYBRGreenI实时荧光PCR-mtDNA技术，建立了SYBRGreenI实时荧光PCR-mtDNA技术鉴别检测饲料中鸽、鹌鹑、总禽类源性成分的方法，其检测最低限均为1.2pg/μlDNA，灵敏度比常规PCR法高100倍；③建立的PCR-mtDNA和SYBRGreenI实时荧光PCR-mtDNA鉴别检测食品和饲料中鸭、鸽、鹌鹑、总禽类源性成分的方法，已应用于进出口动物源性饲料成分的鉴定。该项目为中国监控肉食品与饲料中动物源性产品安全性检测技术提供理论依据和新的技术方法。