[00650354]犬抗细粒棘球绦虫感染的基因工程疫苗研究

该课题用细粒棘球绦虫成虫优势抗原66kD蛋白的cDNA克隆EgA31制备重组抗原，免疫终宿主犬，旨在探讨用于终宿主犬抗感染的基因工程疫苗。用EgA31全长重组蛋白和N－端重组蛋白片断分别经腹腔和皮下免疫注射犬，在第四或第三次注射后用原头蚴攻击感染，45天至50天后剖检观察犬抗感染效果。结果表明，EgA31全长重组蛋白组犬的荷虫量和含孕节虫体数与对照组比较无显著性差异；N－端重组蛋白组荷虫量和含孕节虫体数少于对照组，但也无显著性差异。提示EgA31重组蛋白可能不是诱导终宿主抗成虫感染的良好抗原。 因此，课题组又对新筛选出的EgM蛋白家族的三个cDNA克隆EgM4、EgM9及EgM123进行了重组蛋白的表达和制备。犬免疫实验结果表明，EgM9和EgM123组犬的荷虫量与对照组相比无显著性差异，但这两组的平均含孕节虫数显著少于对照组。提示EgM9和EgM123重组蛋白能夠诱导终宿主犬产生特异性免疫应答，抑制细粒棘球绦虫虫卵的发育。核酸原位杂交实验显示，EgM123主要在早期孕节的睾丸组织中表达，也提示EgM蛋白可能与虫卵发育有关。课题组将对EgM蛋白进行深入研究。