[00679617]Real-Time PCR在马铃薯病毒检测及种薯生产中的应用
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技术详细介绍
我国马铃薯产量居世界首位，马铃薯病毒病可造成50%～80%减产，目前防治的主要方法就是使用脱毒种薯，充分发挥品种的潜能，提高马铃薯产量和质量。最新发展的Real-Time PCR由于其具有操作简单、快速便捷、灵敏度高、重复性好、污染率低等优点，被广泛应用于病原体检测。该试验根据以上几种重要病毒及类病毒保守序列设计Taqman探针及引物，建立了高效的定量检测体系，其灵敏度比普通PCR和ELISA高10～100倍。此外，以马铃薯细胞色素氧化酶基因为内参，建立了三重Real-Time PCR，并应用此方法检测马铃薯继代繁殖过程中的病毒含量变化，确定继代数与病毒积累的关系，为种薯生产提供可靠保证。