[00721249]中药材防风生产质量评价体系的研究

1.防风种子发芽特性的研究。防风种子发芽率和发芽势均较低，首先表现在个体发芽率上的差异，试验所用15株防风发芽率从28.0%到92.0%，造成整体上发芽率较低。由于物种因素，种子刚刚采收后的休眠，个体之间解除休眠时间和进入衰老的时间不一致，致使所有的种子不能全部在同一时间进入发芽高峰，同时，防风发芽的启动日有所差异，15株防风启动日和发芽持续时间相差均为两周以上。采用5-50mg/kg赤霉素、1-10mg/kg6-苄氨基嘌呤、1%KNO3和3%H2O2可提高休眠防风种子的发芽率，赤霉素、6-苄氨基嘌呤可除防风种子的休眠，而1%KNO3和3%H2O2对解除休眠的种子无明显影响。采用多种微量元素，即10-100mg/kgMn2+、10mg/kgCu2+和1mg/kgMo对种子进行处理可显著提高防风种子的发芽率，提示在植株绿果期喷施该类元素也可提高防风种子的发芽率。采用赤霉素、萘乙酸处理幼果，也可以提高种子的发芽率。2.种质选育与质量评价研究。不同产地的防风种子在相同环境条件下种植，赤峰所产防风种子所生产出的中药材质量较高，长势和抗病力最强，其次为泰康所产防风种子。采用0.15%浓度秋水仙碱浸泡胚芽诱导出的多倍体的第一片叶片的叶柄就极为膨大，约为二倍体的2~3倍，特征明显。多倍体在整个生育期叶色深绿，长势较强。形态方面，防风多倍体叶柄变短、细胞变大，具有明显的细胞巨型性，但结实率较低。一年生多倍体防风四种色原酮含量低于二倍体防风16.5~24.0%，而二年生色原酮含量略高于一年生，并且产量高于二倍体18.1％。3.栽培技术对防风药材质量和生产的影响。升麻素、升麻苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷四种含量在1.03%～1.19%之间且每种色原酮的含量均较高，均明显高于直播防风0.61%，几乎是直播防风有效成分的2倍，且不受移栽种苗等级的影响。移栽防风药材性状发生明显变异，以传统的外观性状评价，认为移栽防风质量低劣。以解热、镇痛和抗炎为指标评价不同生产方式所生产的中药材质量，表明栽培的直播防风药材质量较差，而栽培的移栽防风的质量较佳且不低于野生防风，其结果与主要活性成分含量评价结果相一致。对移栽提高防风药材质量的机理研究表明，防风主要有效成分的四种色原酮含量在韧皮部为0.68%、木质部为0.12%，全根为0.82%、侧根为1.44%。侧根中韧皮部的比例为0.86%，主根的0.68%，而四种色原酮类活性成分主要存在于韧皮部，侧根中韧皮部比例大，移栽可使防风产生大量侧根，从而提高防风药材的质量。药理研究证明，移栽防风的解热、镇痛和抗炎的药理活性达到野生防风水平，质量较好，而直播防风质量最差。中耕、高强度光照、低密度及高土壤肥力显著的促进抽薹。采用秋季断叶和生长季节摘薹等物理方法和不同时期喷洒农用链霉素、甲基托布津和硫酸亚铁等化学方法进行控制。早期摘苔可导致植株早期死亡，晚期摘苔可抑制根部腐烂；断叶可显著降低抽薹率，由对照16.25%降至2.00%；春季增叶期用几种农药混合液防治使抽薹率降至11.75%。对防风的主要有效成分四种色原酮含量分析表明，抽薹防风各生长发育阶段药材中四种色原酮含量并未表现出明显的降低，但抽薹防风各发育阶段根的直径并未增长，折干率和单位体积的干重显著低于未抽薹防风。对9月份果实成熟前而根腐烂之前栽培的抽薹防风和未抽薹防风解热、镇痛和抗炎作用进行比较，二者均无显著差异。4.不同药用部位的质量评价。防风的茎有根茎、抽薹地上茎、根部产生的再生茎等几种，而且根茎和再生茎常与根部一同入药使用。对三种茎主要活性成分含量分析表明，再生茎的四种色原酮含量为0.87%，与主根1.11%相近；根茎中的含量为0.60%，仅为主根中含量的50%左右；地上茎中的含量为0.23%，仅为防风根中的20%左右。采用计算机辅助中药指纹图谱相似度计算软件对防风不同部位中药材高效液相色谱图谱进行初步分析，多年生根、一年生再生茎、多年生再生茎和根茎的共有峰峰面积相似度均在0.920~0.950之间，表明成分种类及比例无明显差异，地上茎相似度为0.692，相差较大。