[00756864]硒对肾间质纤维化大鼠肾间质结缔组织生长因子表达的影响

浙江省是国内少有的具有富硒与低硒区域相互交融的地理地貌特征的地区之一，这一地理地貌特点对研究硒与人类疾病的相关性具有得天独厚的条件。因此，如何充分利用浙江经济发达，科技进步，交通便利等优势加大硒与包括肾脏病在内的多种疾病的基础研究，进而综合开发、利用该省丰富的硒资源，尤其富硒中草药资源，研究开发富硒药品，改善人民群众的健康状况，为该省经济建设服务，是摆在该省医药科技人员面前的一项重要任务。该课题基于上述经济与社会需求背景，在课题组近10余年来致力于硒与肾脏病相关性的基础与临床研究的基础上而设计，拟从分子生物学层面对微量元素硒对肾间质纤维化大鼠肾间质纤维化、结缔组织生长因子(CTGF)表达、氧化应激损伤以及肾小管上皮细胞转分化(TEMT)的影响进行研究与探索，旨在探讨补硒治疗对减轻肾间质纤维化的作用及其可能机制，为肾间质纤维化治疗的新靶点提供科学依据，以期拓宽国内肾脏病的研究范畴。该项目以单侧输尿管结扎致单侧输尿管梗阻(UUO)建立肾间质纤维化大鼠模型。将90只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、UUO组(B组)、UUO+硒组(C组)、UUO+硒及维生素E组(D组)、UUO+苯那普利组(E组)，每组18只。C、D、E组分别给予亚硒酸钠0.2mg/(kg-1·d-1)、亚硒酸钠0.2mg/(kg-1·d-1)+维生素E200mg/(kg-1·d-1)和苯那普利10mg/(kg-1·d-1)灌胃。A、B组给予同等剂量生理盐水灌胃。术后第7、14、21d各组随机处死6只大鼠，肾组织行HE、Masson染色评定肾间质纤维化程度，免疫组化半定量法检测肾间质CTGF、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅲ胶原(ColⅢ)的表达，Western印迹法检测肾组织CTGF、TGF-β1蛋白表达，化学比色法检测肾组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。观察补硒后肾间质病变、氧化应激指标以及CTGF、TGF-β1、α-SMA和ColⅢ表达的变化及其相互间的关系。研究结果证实：补硒可通过抑制氧化应激反应、减少肾组织TGF-β1、CTGF过表达，抑制TEMT，减少细胞外基质(ECM)集聚而延缓或减轻UUO模型大鼠肾间质纤维化。其主要研究成果与创新点有：证实了氧化损伤，肾组织TGF-β1、CTGF、α-SMA和ColⅢ表达增强与UUO模型大鼠肾间质纤维化关系密切，它们在肾间质纤维化的发生与发展中起重要作用。发现过强的氧化应激反应可能通过上调肾组织TGF-β1、CTGF的表达，诱导TEMT，促进ECM合成而引起或加重肾间质纤维化；补硒治疗后UUO模型大鼠肾组织中SOD、GSH-Px含量明显升高、MDA含量明显下降，TGF-β、CTGF、α-SMA和ColⅢ表达明显下调，肾间质纤维化程度明显减轻，证实硒可通过抑制氧化应激反应、减少肾组织TGF-β1、CTGF的过表达，抑制TEMT，减少ECM集聚而延缓或减轻肾间质纤维化。该研究成果已在国内权威及核心期刊上发表论著3篇，成果查新显示国内外尚未见类似研究报道，提示该研究的初步成果具有探索性、创新性、先进性和实用性。总之，该研究证实补硒治疗在防治肾间质纤维化中具有潜在的临床应用价值，可能是延缓或减轻肾间质纤维化的另一新的治疗靶点。其研究成果拓展了国内肾脏病的研究范畴，为今后进一步从不同分子水平探讨与研究微量元素硒减轻肾间质纤维化、延缓慢性肾脏病进入终末期肾病的机制奠定了一定的基础，也可能有助于该省微量元素硒相关性医药市场的开发与科技创新。