[00767702]人噬菌体抗体库的构建及人源性bFGF抗体的筛选
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技术详细介绍
该项目对自身免疫患者血样进行检测，从395份自身免疫患者血样标本中检测到高滴度抗bFGF自身抗体，进一步证明了bFGF自身抗体广泛存在于自身免疫患者中。项目收集了高滴度抗bFGF抗体患者血样，分离淋巴细胞，经RT-PCR获得轻、重链基因，成功构建了抗bFGF噬菌体抗体库。对该抗体库的鉴定结果显示，该抗体库具有较高的bFGF特异性和一定的多样性。三轮筛选后随机挑选噬菌体抗体克隆，经酶切和ELISA鉴定，成功获得了具有高亲和力抗bFGF的抗体克隆。经测序分析显示，成功获得了人源性抗bFGF抗体基因。项目制备了bFGF单克隆抗体，从18株高效价的杂交瘤细胞株中挑选到3株具有抗肿瘤活性的细胞株。