[00781278]宫颈癌相关HPV基因型DNA芯片与基因诊断系列研究

课题的来源与背景：该课题来源于深圳市科技局立项课题(项目编号：200304017)和卫生部医药卫生科技发展研究中心科研课题(项目编号：WKJ2007-3-001)。宫颈癌是最为常见的恶性肿瘤之一，在世界范围内，每年大约新增宫颈癌患者500,000例，而中国每年新增患者约131,000例。近年来，研究表明对人乳头瘤病毒(Humanpapillomavirus,HPV)和宫颈癌变过程中一些标记物进行有效的检测是宫颈癌预防和治疗的重要途径。研究的目的意义：建立能够同时检测多种宫颈癌相关HPV及基因分型的基因芯片，为临床检测提供高效、平行分析，低成本的HPV基因检测分型技术提供可行的解决方案；探索妇女人群中hTERC基因扩增与宫颈癌发生及发展的关系；研究miRNA在无HPV感染宫颈正常及癌组织中表达的差异性，为妇女宫颈癌筛查、早期诊断及预后评估提供新途径。主要论点及论据：常用的筛查方法多采用细胞学检查、人乳头瘤病毒(HPV)等。分子流行病学研究已证明HPV与宫颈癌变密切相关。而用于HPV分型的常见技术主要有普通聚合酶反应(PCR)法、荧光定量PCR法、HC2杂交捕获法和基因芯片法等。其中基因芯片法可以将多种探针固定在同一张膜上，能同时参与检测样本DNA而又不互相干扰，检测耗时少，不仅适用于临床小量样本检测，也适用于大批量筛查。染色体异常是肿瘤发生的基础，研究显示常见染色体3q增加和2、3、4、6p，11q的缺失，且异常基因区多位于3q26.1～q28。近年来，美国NIH直接领导的针对宫颈癌的研究表明，宫颈细胞由非典型性发育异常向癌转变的过程中几乎都伴有3号染色体长臂的扩增。其中最重要的基因可能是人类染色体端粒酶基因(hTERC基因图位于3q26.3)。该基因的扩增可阻止细胞凋亡，导致肿瘤产生。对中国妇女hTERC基因异常扩增的研究有利于宫颈癌的筛查及早期诊断。大量研究证明miRNA与多种肿瘤发生密切相关，miRNA既可作为抑癌基因下调原癌基因活性，也可作为癌基因下调抑癌基因活性。因此，对宫颈正常及癌组织miRNA表达差异性的研究有可能为宫颈癌的筛查提供新的标记物。创见与创新建立了一套HPV基因分型技术，并应用于深圳市HPV流行病学的研究；探索了妇女人群中hTERC基因扩增与宫颈癌发生及发展的关系，发现hTERC基因扩增与临床病理诊断密切相关；研究了miRNA在无HPV感染的宫颈癌及正常组织中的表达存在显著差异，为妇女宫颈癌筛查、早期诊断及预后评估提供了新途径。创新点：(1)率先将关于宫颈癌相关人乳头瘤病毒HP基因分型导流快速反斑点印迹杂交技术应用于基因芯片的研制研究；(2)不仅将HPV基因分型导流杂交法技术应用于深圳人群HPV流行病学的研究而且对桂林市及周边地区妇女人群中hTERC基因扩增与子宫颈癌发生及发展的关系进行研究；(3)首次对关于miRNA在无HPV感染的宫颈癌及正常组织中的差异表达进行了研究。效益及存在问题：中国每年有12万新发宫颈癌病例，并有逐年增加倾向，该研究结果对宫颈癌的预防、治疗和提高妇女的健康水平有着积极的社会和经济效益。但是，HPV感染与hTERC基因扩增的关系研究仍需要大量经费，希望得到后续经费支持并进行更深入的研究。