[00859855]应用cDNA芯片技术从水稻中分离克隆组织特异性启动子
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技术详细介绍
非植物来源基因是改良水稻品种的丰富的基因资源。从植物生长发育、生物安全和消费者心理等方面考虑，多数外源基因的产物只需要在特殊组织或特殊时间表达。组织特异性启动子和逆境诱导的启动子是实现基因产物特异表达的关键元件。本课题的研究目标是分离克隆两个水稻启动子。我们采用cDNA芯片技术，通过首先鉴定组织特异表达的基因和病原诱导表达的基因，分离克隆了两个水稻启动子(D54O和D53I)。启动子D54O是组织特异性启动子。将D54O与Gus基因连接，转入水稻，获得一批转基因植株。检测发现，由D54O调控的Gus基因只在叶片和叶鞘中表达，不在根、茎和胚乳中表达。该启动子可用于利用非植物基因改良水稻品种，而不影响食品的安全性。启动子D53I是病原诱导的启动子。将D53I与Gus基因连接，转入水稻，也获得一批转基因植株。检测发现，由D53I调控的Gus在无病原侵染时不表达，而接种白叶枯病菌8小时后开始表达。该启动子可用于水稻抗病基因工程育种。