[00864796]隐孢子虫病诊断试剂盒的研究

隐孢子虫病是由隐孢子虫感染而导致人和动物腹泻的重要疾病，也是人类艾滋病患者的主要致死因素之一。以往对该病的检测主要通过粪便中的卵囊检查，方法费时、费力、检出率低。之后的PCR方法虽特异性强、敏感性高，但由于该方法技术难度大，不易推广应用。近年采用的间接血凝试验、ELISA方法检测血清抗体和用单克隆抗体的直接免疫荧光反应等技术检测抗原，对于后者国内尚没有一株单抗用于临床检验，前者所用抗原均为卵囊裂解物，存在特异性差的问题。该研究利用在E.coli表达的CpP23蛋白为抗原，建立了检测微小隐孢子虫病的间接ELISA方法。该试剂盒与德国R-Biopharm公司的试剂盒进行检测比较，符合率为100%；免疫成色反应(ICT)同自建ELISA方法进行检测比较，结果两种检测方法在检测大动物的隐孢子虫病上有100%的相符性；间接免疫荧光试验(IFAT)同自建ELISA方法进行检测比较，相符性100%。说明自建ELISA试剂盒具有高度的可靠性、特异性和敏感性。国内研究者应用P23蛋白所建立的方法中不具备抗原自身的对照，该研究基于GST-CpP23为诊断抗原的系统本身具备GST抗原对照，因此该研究中所建立的检测系统是完整的标准系统，符合国际通用标准。该试剂盒为隐孢子虫病的检测提供了简便、快速和准确的诊断方法，项目组收集了该省大部分地区的家畜家禽、野生动物血清样品共4810份，并对这些血清样品进行了ELISA检测。从检测结果来看，被检测的家畜家禽、野生动物中不同程度地存在隐孢子虫感染。在部分动物感染率较高，说明在该省隐孢子虫病已经呈大范围流行，该病的预防和控制已变得极为重要。而自建的ELISA试剂盒为隐孢子虫病的检测提供了简便、快速和准确的诊断方法，在该病的防控中必将发挥应有的作用，应用前景极为广阔。