[00870662]鸡内源性限制因子对雏鸡感染传染性法氏囊病病毒的调控及应用

该项目依托2016年河南省科技攻关项目和2013年教育厅高校科技创新人才项目，并分别于2018年3月和2016年11月通过结项验收(验收编号162102110038和教科技【2016】960号)。 河南省是禽类养殖大省，提高禽类免疫力对养禽业的生产效率至关重要。鸡传染性法氏囊病(IBD)是影响养鸡产业健康发展的重要疫病，其病原(IBDV)不但能够引起鸡的免疫抑制，降低疫苗保护力，而且该病原极难从环境中清除，给养鸡业造成极大风险。尽管IBD临床发病较少，但其隐性感染会造成法氏嚢损伤，导致疫苗保护力差。该项目研究了具有免疫调节功能的Ghrelin、Rab和抗病毒基因Mx、IFITm³及趋化因子CCR5、CXCR4等鸡内源性限制因子在IBDV感染过程中的作用，为提高畜禽健康水平，减少IBDV隐性感染、提高疫苗保护力提供新思路。取得了如下成果： (1)阐明了禽类Ghrelin在鸡免疫器官的分布与定位，探讨了延迟喂食和病毒感染对Ghrelin水平的影响，揭示了Ghrelin在IBDV感染中的作用及机制。Ghrelin在鸡免疫器官均有表达，胸腺内主要定位于髓质灰白的泡周围；延迟喂食显著下调Ghrelin在血清和腺胃中浓度，IBDV感染后血清Ghrelin浓度和法氏囊中Ghrelin的基因表达均明显上调；外源性添加Ghrelin能够减轻IBDV感染导致的法氏嚢损伤，该作用与添加Ghrelin抑制IBDV感染导致的炎症因子过度表达、减少T淋巴细胞浸润、降低趋化因子的表达有关。 通过小分子颗粒包裹喷雾方式添加Ghrelin抑制了雏鸡IBDV的感染，减轻了感染后法氏嚢损伤造成的免疫抑制，提高了疫苗效率和动物生产性能，降低了生产成本。该成果在河南省多家鸡场使用效果较好，每年受保护的鸡只超过数十万只，超过百万枚种蛋间接获益，年均获益2061万元，给企业带来较好的经济效益，还保护了养殖周边生态环境，具有良好的社会效益。 (2)揭示了Rab蛋白在细胞内定位变化与IBDV感染的关系。Rab蛋白呈点状分布与细胞器定位在一起发挥功能，IBDV刺激后Rab蛋白分散到整个细胞质中，失去了其功能特征；IBDV感染能引起Rab蛋白点突变，而细胞转染点突变Rab后的分布现象与IBDV感染的分布现象一致。表明IBDV可调控Rab蛋白的细胞定位和点突变，影响其正常功能。 (3)绘制了雏鸡IBDV感染早期基因表达谱，筛选出两个能够抑制IBDV增殖的蛋白，趋化因子也能减少IBDV增殖。感染早期，上调基因676个，下调基因83个；构建的IFITm³和Viperin真核表达载体转染DF-1细胞能抑制IBDV增殖。雏鸡注射CCR5和CXCR4拮抗剂能减少IBDV增殖。相关蛋白改造后与病毒特定结构组合，结合申请的专利饲料配方可应用于实践中防控家禽病毒性病原感染。