[00875895]抗凝血类杀鼠药快速检测方法

近年来，使用杀鼠药投毒或自杀的事件时有发生，严重影响了社会的安定和人民生活的稳定。快速准确地检测中毒者尿液，以确定毒物名称，为及时给医院抢救提供方向和给事件性质定性提供依据，是当前相关部门研究的方向。目前抗凝血类杀鼠药的中毒现象时有发生，因此准确、快速地检验抗凝血类杀鼠药(10min之内给出结果)具有重要的实际意义。常规的免疫分析方法主要利用在抗体上标记放射性同位素、酶、荧光物质等，在待测抗原与标记抗体特异性反应后，洗板分离，通过测定标记的放射性同位素或荧光物质的信号，或测定标记酶作用于底物所产生的电活性物质、发光物质等的信号进行测定。近几十年来，免疫分析技术结合了抗原、抗体分子间的特异性识别反应和电化学、光谱学、声学等技术的灵敏、方便等特性，以其对分析物的高选择性和高灵敏性，成为临床，生物化学，环境分析等各个领域重要分析手段之一。在所有这些方法中，无论标记的是何种物质，都需要得到特异性强、灵敏度高的单克隆抗体，而单克隆抗体的获得需要有特异性强的免疫原。小分子化合物本身不具备免疫原性，因此免疫原的合成至关重要。免疫原的合成通常是将小分子化合物与牛血清白蛋白BSA联结，联结的位置直接影响单克隆抗体的特异性。该发明提供了一种能快速准确地检测出中毒者尿液中抗凝血类杀鼠药成份的抗凝血类杀鼠药免疫原的合成方法，它给医院及时抢救提供依据，同时给中毒事件性质定性提供方向。该发明的优点是：1、抗原和BSA联结的位置直接影响单克隆抗体的特异性，该发明选择在识别不重要的羟基位置进行联结，合成出的抗凝血类杀鼠药免疫原特异性强，可为进一步免疫动物，为制备出特异性强的单克隆抗体打下了良好的基础；2、该发明中合成方法简单、易操作，不需要特殊的仪器设备。该发明公开了一种能快速准确地检测出中毒者尿液中抗凝血类杀鼠药成份的抗凝血类杀鼠药免疫原的合成方法，它以4-羟基香豆素为半抗原，利用酯化反应进行化学修饰得到香豆素-琥珀酸酯，通过混合酸酐法的氯甲酸异丁酯法进行偶联，通过葡聚糖G50凝胶柱纯化，冻干，合成出的抗凝血类杀鼠药免疫原特异性强的抗凝血类杀鼠药免疫原的结合物，该免疫原可以用于免疫动物，进一步制备出用于检测用的抗凝血类杀鼠药的单克隆抗体。该发明广泛适用于临床，生物化学，环境分析等各个领域中。